101897

•    wyciszanie genów opisane po raz pierwszy w 1992 u N.crassa.

•    Mechanizm ten polega na wyciszaniu genów przez RNA< podobnie jak PTGS (poranskrypcyjne wyciszanie genów) oraz iRNA (interferencje RNA) u ssaków.

•    Quelling to odwracalna inaktywacja ekspresji genów poprzez transformację powtarzającymi się sekwencjami homologicznymi.

•    Quelling występuje podczas wegetatywnej fazy wzrostu i wpływa zarówno na transgeny jak i na geny endogenne:

Proces quelling:

1.    Faza wegetatywna

2.    Dużo powtarzających się sekwencji

3.    Rozpoznanie ich przez RdRP

4.    Powstaje transkrypt dsRNA

5.    Degradacja przez DICER do siRNA

6.    RISC degraduje siRNA - degradacja RNA homologicznego

Quelling obejmuje IV etapy:

1)    Transkrypcja transgenu

2)    Synteza 2-niciowego RNA przez polimerazę zależną od RNA

3)    Degradacje produktów do 21-23 nukleotydowych fragmentów

4)    Niszczenie homologicznego RNA przez endonukleazy

Mechanizm ten może być powiązany z metylacją

Uzyskane różne mutanty qde (quelling deficient- uszkodzony system qualling) u N.crassa

•    Pozwoliły poznać ten mechanizm i powiązać go z siRNA.

•    Wykazano, że mutant qde-l ma uszkodzoną polimerazę RNA zależną od RNA (RdRP).

Podobny sposób wyciszania genów u wszystkich Eukariota wskazuje, że zjawisko wyciszania genów

przez RNA jest ewolucyjnie konserwatywne.

4.2 MSUD (meiotic silona ng by unpaired DNA):

•    Występuje podczas mej ozy

•    MSUD był wykryty u N.crassa podczas “transvection” (transfekcja) genu Asm-1.

•    Zjawisko epigenetyczne w wyniku którego zachodzi interakcja pomiędzy allelami na chromosomie i odpowiadających mu alleli na chromosomie homologicznym.

•    Transvection może prowadzić do aktywacji genu lub jego represji. Może także występować pomiędzy nie-alellicznmi regionami genomu jak również w regionach genomu, które nie są transkrybowane.

Funkcja MSUD:

•    Jeżeli N.crassa jest haploidalny podczas wegetatywnej fazy wzrostu, to podczas fuzji jąder przeciwnych typów płciowych może powstać diploidalna zygota, w której następuje parowanie chromosomów homologicznych.

•    MSUD uniemożliwia ekspresję genów, które są obecne tylko na 1 chromosomie rodzicielskim i nie mają swojego partnera w mej ozie.

•    MSUD wpływa na każdą kopię genu niesmarowanego, tzn jeśli jakiś gen ma 3 kopie na 1 chromosomie, a tylko 2 na chromosomie homologicznym, to kopia bez pary będzie wyciszana.

Przykład:

1) Krzyżówka:

asml x asm1^M (wycięty gen) -> brak dojrzałych spor. bo asm1 musi mieć swoją parę w czasie

maj ozy.