101908

•    Translokacje - zmiana rozmiaru chromosomu o ok. 100 kb (taka zmiana widoczna w elektroforezie pulsacyjnej).

Kariotypy grzybów fitopatogennych:

Do identyfikacji szczepów wykorzystywane są 3 techniki:

1)    PFGE

2)    RFLP

3)    Analiza izoenzymów

5, Opis RFLP;

•    Mamy gen wyjściowy. W tym genie znajduje się miejsce restrykcyjne rozpoznawane przez restiyktazę.

•    Jak go potniemy restyktazą w tym miejscu restrykcyjnym to są generowane są np. dwa fragmenty dające prążek o masie 300 i 700 Mbp

• Jeżeli dojdzie do mutacji w miejscu restrykcyjnym to pojawi się 1 prążek o masie 1000 Mbp

• Jeżeli pojawi się miejsce restrykcyjne w innym miejscu tego genu to pojawiają się np. dwa prążki ale o masie 400 i 600 Mbp

Przykłady kariotypów fitopatogenów grzybowych:

1)    Izolaty Leptosphaeńa maculans:

•    Infekują rzepak

•    Silnie wirulenme szczepy = 6-8 prążków

•    Słabo wirulenme szczepy = 12-14 prążków

Zbadano je pod kaem różnic w liczbie chromosomów i rozmiarach.

2)    Septaria nodorum

•    Infekcje pszenicy lub jęczmienia

•    Adaptacja do każdego z żywicieli powoduje zmiany biochemiczne i fizjologiczne. Chromosom B:

•    Dodatkowy chromosom występuje u ludzi, zwierząt i grzybów fitopatogennych.

Nectria haematococcoa:

•    Obecność chromosomu B o wielkości 1,6 Mb.

•    Na tym chromosomie jest gen Pda6, który koduje koduje dimetylazę pistatynową

•    Został on zmapowany na chromosomie B.

•    Infekcja Pisum sativum (groszek) przez Nectria zależy od zdolności grzyba do detoksykacji pistatyny, czyli niezbędna jest obecność genu Pda6, a tym samym obecności chromosomu B.

Na różnice w wielkościach chromosomów ma wpływ :

•    Jaki rodzaj elektroforezy pulsacyjnej zastosowaliśmy

•    oraz czy markery wielkości pochodziły z S.cerevisiae, czy z Spombe.

Kariotypowanie ełektroforetyczne - zastosowanie:

•    Identyfikacja chromosomów homologicznych

•    Mapy restrykcyjne

•    Badanie występowanie genów biosyntezy np. antybiotyków

Kariotypy grzybów^ patogennych dla ludzi:

Ludzkie mikozy dzielimy na 3 gn

1)    Powierzchniowe

2)    Podskórne