55286

Większe (masa cząsteczkowa) białko przyłącza więcej sds

bisakryloamid bywa dodawany

elektroforeza denaturująca - sds

relative mobility

(masa w skali logarytmicznej)

tu masę monomeru, na sefadeksie masę dimeru

chromatografia powinowactwa

Wykorzystuje poinowactwo białka do specyficznych grup chemicznych Wykorzystuje np. konkanawalinę (lektyna) chętnie wiąże glukozę połączenie kowalencyjne

Elucja interesującego nas białka dużymi stężeniami rozpuszczalnej formy Dawniej stosowano cyjanobromowana sefaroza przeciwciała mocno wiążą - problem z wymyciem

wysokociśnieniowa chromatografia cieczowa HPLC

Nośniki muszą być odporne na ściskanie w wysokim ciśnieniu do 5000 psi można stosować szybki przepłwy stosuje się do chromatografi jonowyienej w filtracji żelowej

chromatografia odzieływań hydrofobowych HIC

Białka adsorbują się na złożu dzięki występowaniu odziaływań dydrofobowych fragmetnów białak z silnie ydrofobowymi Ugandami, przy steżeni soli bliskiej wysolieniu

Wymywająca fuborem o melajacym dradiencjie siły jonowej obiżając polamości

ogniskowanie izoelektrycznej

Technika wykorzystuej żóznice punktu izolektetycznego W tym pH ruchliwość elektroforetyczna jest równa zero bo v=Ez/f gdzie E - naęzenie pola elektrycznego z wypadkowy ładunek cząsteczki f wspólczynk tacia

Gdy mieszaninę baiłek podda isę elektroforezie w dradiencjie pH w żelu bez sds to kżde białeko będzi emigrowało do momentu osiągnięcia pozcji w której pH żelu jest równe punktowi izoeketrcznemu baiłaka

Po ogniskowaniei elektroforeza SDS - eketroforeza dwukierunkowa (pi i masa)

Wirowanie w gradiencjei sacharozy rotor do poziomego ukąldu probówki

oczyszanie craz lepsze:

liomogenizacja

wysalanie

chromatografia jonowymiena filtracja żelowa

chromatografia pofinowacctwa