67264

się metodą spektrofotometryczną. Zielony kolor chlorofilu spowodowany jest wysoką absorpcją w czerwonej i niebieskiej części spektrum światła, a ruską absorpcją w zielonej części spektrum, przy długość fali 500-600 run (Rys 2).

Rys.2. Widmo absorpcyjne chlorofili a i b

Chlorofile są dosyt nietrwałe. W żywych tkankach występują w formie związanej np. z białkami, fosfolipidami, co powoduje stabilność zielonej barwy Z kolei zniszczenie żywej tkanki roślinnej oraz struktury clilorofili poprzez np. ogrzewanie, odwadnianie, kontakt z rozpuszczalnikami, enzymami, prowadzi do przemian clrlorofili i zmiany barwy. Rozpad clilorofilu przyśpiesza również działanie światła i tlenu. W środowisku kwaśnym następuje przemiana clilorofilu. związana z zastąpieniem jonu magnezu poprzez dwa jony wodoru i powstanie feofityny (oliwkowozielona) lub przy niższym pH. również odszczepienie fitolu i powitanie feoforbidyny (brunatna barwa). Środowisko zasadowe prowadzi do hydrolizy wiązań estrowych, z zachowaniem jonu magnezu w strukturze clilorofilu a produktami reakcji są clilorofiliny (zielona barwa), które pod wpływem enzymu clilorofilazy tracą fitol i przekształcają clilorofilidy. Chlorofile z łatwością ulegają reakcji winiany jonów magnezu na jony metali dwuwart ości owy cli. takich jak żelazo (barwa szarobnuiatna). miedź, cynk (zielona barwa).

Barwniki cliłorofilowe, jak również ich pochodne, znajdują zastosowanie w przemyśle spożywczym, kosmetycznym i farmaceutycznym (clilorofil. służy do barwienia past do zębów, płynów do ust. niektórych mydeł i kremów, ma właściwości dezynfekcyjne oraz przyspiesza regenerację naskórka i gojenie drobnych podrażnień skóry, stąd wykorzystywany jest w kosmetykach do pielęgnacji cery przetłuszczającej się. szarej i zmęczonej; poprawia ukrwienie skóry, wzywając na lepsze jej dotlenienie i odżywienie).

Wykonanie oznaczenia

1. Ekstrakcja clilorofilu

Oznaęzemą wykóltaę dla 3 łWIlOlggłyęllPŁÓMl

Próbkę (liście, rośliny zielone) o wudze około 0.5 g pociąć nożyczkami na małe kawałeczki. Odważyć 0.2-0.3 g. przenieść do suchego moździerza porcelanow-ego i dodać 2 ml metanolu. Rozcierać ostrożnie tłuczkiem aż do uzyskania zielonej pasty. Dodać kolejne 2 ml alkoholu i rozetrzeć na jednorodną pulpę Przelać zawiesinę (poprzez lejek) do 25 ml cylindra miarowego (z korkiem). Kolejnymi porcjami metanolu (2x2 ml) myć moździerz i thiczek. przenosząc popłuczyny do cylindra. Dodać do cylindra tyle metanolu by suma roztworu w rum zawarta wynosiła 10 ml (tj. 2-3 ml). Zamknąć cylinder korkiem i wytrząsnąć zawartość przez 10 sek.. a następme odstawić w ciemne miejsce na około 15 min. do rozdziału faz. Ponownie określić ilość fazy ciekłej i zapisać jej objętość. Pobrać z górnej części około 5 ml roztw^rom alkoholowego (ekstraktu) i przesączyć go przez (zwilżony kilkoma