• Obliczanie wartości AA26o dla każdego kroku denaturacji (obliczenia na kroku 1. pozostałe analogicznie):
A^2óo = Azeo ~ ^260* gdzie: A2eo = absorbancja roztworu DNA w danej temperaturze X = 260 nm
^260 = absorbancja natywnej formy DNA w temp pokojowej
AA2go= 0,756169 - 0,7505 = 0,005669
• Obliczanie średniej absorbancji roztworu DNA w kolejnych krokach denaturacji (obliczenia na kroku 1. pozostałe analogicznie):
^260 = 1^260 “ aAjJo1 |» gdzie n - krok denaturacji M2(A = I0J01472 - 0,01544| = 0,00071
• Obliczanie zmiany absorbancji A/l^Jj jaka przypada na zmianę temperatury roztworu DNA AT (obliczenia na kroku 1. pozostałe analogicznie):
A Al*, 0,00071
A T 2
0,000355 [-]
Lp. |
T (°C) |
A260 |
A A260 |
T„ [°C] |
Ai42£o |
^*260 r11 NT LoCJ |
1 |
60 |
0,76522 |
0,01472 |
61 |
0.00071 |
0,000356 |
2 |
62 |
0,76594 |
0,01544 | |||
3 |
64 |
0,76804 |
0,01754 |
65 |
0,00190 |
0,000948 |
4 |
66 |
0,76994 |
0,01944 | |||
5 |
68 |
0,77616 |
0,02566 |
69 |
0,01601 |
0,008006 |
6 |
70 |
0,79217 |
0,04167 | |||
7 |
72 |
0,82164 |
0,07114 |
73 |
0,03791 |
0,018953 |
8 |
74 |
0,85954 |
0,10904 | |||
9 |
76 |
0,90035 |
0,14985 |
77 |
0,02955 |
0.014776 |
10 |
78 |
0,92990 |
0,17940 | |||
11 |
80 |
0,95719 |
0,20669 |
81 |
0,01717 |
0,008582 |
12 |
82 |
0,97436 |
0,22386 | |||
13 |
84 |
0,98991 |
0,23941 |
85 |
0,00664 |
0,003319 |
14 |
86 |
0,99655 |
0,24605 | |||
15 |
88 |
1,00148 |
0,25098 |
89 |
0,00217 |
0,001085 |
16 |
90 |
1,00365 |
0,25315 | |||
17 |
92 |
1,00374 |
0,25324 |
93 |
0,00068 |
0,00034 |
18 |
94 |
1,00306 |
0,25256 |