84843

Badanie inhibicji cząstek pokrytych nano-srebrem w obecności antybiotyków

Badanie przeprowadzono dla trzech antybiotyków: cephalexinu, oflaxacinu, neoflaxinu. Antybiotyki rozcieńczone lOOkrotnie rozpuszczono w lOml dejonizowanej wody. Następnie 5ml powstałego roztworu zmieszano z 5ml nano-srebra. Mieszanie z mieszadłem magnetycznym utrzymywano przez 3h w40C. Otrzymany homogenat wysuszono w 50C. otrzymany suchy produkt zawieszono w lOOml wody dejonizowanej. W tak otrzymanym roztworze zanurzono kawałki cewnika. Po czasie inkubacji ( 37C,24h) kawałki cewnika wysuszono w 50C.

WYNIKI

Synteza nano-srebra została potwierdzona przede wszystkim poprzez zmianę koloru roztworu. Brązowe zabawienie pojawiało się po dodawaniu kroplami borowodorku sodu i cytrynianu sodu. Zsyntetyzowane Nanocząsteczki srebra pojawiają się na spektroskopii UV-VIS w postaci piku przy 420nm. Rozmiar (40-60nm) i kształt cząsteczek został zobrazowany na obrazie mikroskopowym (SEM).

Analiza spektrofotometryczna wykazała, że wszystkie każde badane stężenie powoduje inhibicję powstawania biofilmu. Maksimum inhibicji przypada na stężenie lOOug/mg.

Matriks biofilmu składa się prawie wyłącznie z całych węglowodanów i białek. Ilość tychże zmniejsza się w każdym teście - po dodaniu nanocząsteczek, powleczeniu nimi cewnika oraz w teście z antybiotykami. Zaobserwować można synergiczny efekt inhibicji. Stężenie węglowodanów i białek w biofilmie zmniejsza się w każdym kolejnym doświadczeniu.

Obrazowanie mikroskopem elektronowym wyraźnie potwierdza, że powlekanie cewnika nano-srebrem przebiegło pomyślnie. Na powierzchni wyraźnie obserwować można cząsteczki srebra. Inhibicja powstawania biofilmu na cewnikach powleczonych nano-srebrem wzrasta wraz z czasem inkubacji (zanurzenie cewnika w roztworze nano-srebra). Kompletna inhibicja notowana jest przy czasie inkubacji równym 18h. Obraz SEM pokazuje kompletną degradację biofilmu.

Dowiedziony został synergiczny efekt inhibicji biofilmu podczas stosowania antybiotyków. Każdy z badanych antybiotyków wykazał kompatybilność z nanocząsteczkami srebra. Całkowite stężenie węglowodorów i białek w matriks biofilmu jest znacznie niższe, gdy cewnik powleczony został roztworem antybiotyku i nano-srebra. Największy procent inhibicji obserwujemy przy użyciu oflaxacinu (99,1%)