2808184955

Replikacja:

Warunki inicjacji replikacji i kontrola przejścia Gl/S:

*    destabilizacja nukleosomu (częściowa proteoliza)

*    aktywacja T antygenu w OR (orlgln of repllcatlon), interakcja z SW1, ISWI (białka modyfikujące strukturę DNA) i hellkazaml (białka rozplatające helikalną strukturę DNA).

*    aktywacja CDK2 (jednej z cyklinozależnych kinaz, z cyklina A tworzy SPF = Slnthesls Promotlng Factor) i inakty wacja Inhibitora p21 (blokuje T antygen, czyli białko reagujące z OR) stymulowanego aktywnością białka p53 (antyonkogen, nie pozwala na aktywację białek doprowadzających do podziału komórki wtedy, gdy zachodzą błędy w strukturze DNA - gdy jest ich za dużo, komórka ulega apoptozie, czyli "programowej'' śmierci). Inhibitorami SPF są również białka plfi / pl8 zależne od ścieżki Ras!

Mutacja p53, retinoblastomy, MDM -> onkogeneza!

Działanie białka p53:

*    powoduje syntezę białka p21, które w blokuje replikację

*    hamuje działanie białka MDM (inhibitor aktywności p53)

*    aktywacja BAK (czynnika apoptozy, który wraz z MYO powoduje aktywację kaspaz)

Geny kontrolujące przemienność faz sDNA i M:

*    nim 1 - kontrola przejścia Gl/sDNA: bez tego genu komórka wchodzi w mitozę bez replikacji; jego nadekspresja powoduje kolejne replikacje bez mitoz (a więc prowadzi do poliploidii)

■    cdc 18 - brak powoduje przedwczesne wchodzenie w replikację, nadekspresja - poliploidyzację

*    cdc 13 (produkcja cykliny B) - mutacja powoduje brak MPF (brak mitoz) i poliploidyzację

■    cdc 20 - prtokinaza, powoduje aktywację cdc25 (a on aktywuje MPF)

■    pds 1 - kontroler przejścia met/ana (precocios dissociation of sister chromatids)

■    APC - kontroler równowagi napięć w płytce metafazowej, regulowany przez MPF (fosforylacja przez cdc27), inhibicja przez rum 1, degraduje pds 1 i cykliny, składa się z cdc34, edc27, cut 4p, kuliny cdc 4 i cdc 53 oraz z proteasomów.

Mechanizm kontrolny zapobiegający pulweryzacji reguluje:

■ wejście w fazę sDNA (rozpoczęcie replikacji) - s-phase cheekpoint

■    niezakłócony przebieg całej jednorazowej replikacji genomu (dzięki ORC = origin replication complex, czyli licencji do replikacji DNA, dołączonej przed replikacjądo wszystkich replikonów) -demage cheekpoint i topo II cheekpoint

■    w trakcie replikacji do chromatyny przyłączane są kondensyny (smcl / smc3) i kohezyny (sccl / scc3) - zapewniają one łączność chromatyd po replikacji

*    w przypadku pojawienia sie wolnych końców nici DNA (powstają przejściowo w wyniku aktywacji topoizomeraz rozcinających nici i łączących je tak, żeby były mniej skręcone w trakcie syntezy DNA; generalnie jest to sygnał nieukończonej replikacji) aktywowana jest Idnaza alarmowa ATM wstrzymująca przejście metafaza / a na faza

*    przejście met / ana wiąże się z aktywacją łagodnej proteolizy proteasomowej przez aktywację APC cdc20 (anaphase promoting complex).

Aktywacja replikacji DNA:

•    aktywacja kopleksu CDK 4/6 + cyklina D

•    fosforylacja białka natlnoblastoma (Rb; też antyonkogen), powoduje unieczynnienie białka p53 i uwolnienie p21 z T antygenu oraz aktywację transkrypcji białek, syntezę cykjliny E i jej aktywację.

•    SPF fosforyluje T antygenu na kluczowej treoninie

•    PP2A defosforyluje T antygen na kluczowej serynie

•    Rozpoczęcie replikacji (ssaki): podłączenie hellkazy TOPI, pollmorazy PCNA, pollmerazy gamma, prymazy RNA, białka destabilizacji, wy cl sza cza prlmera RNA, llgazy...