Szczegółowy opis zastosowanych metod badawczych:
Z dostarczonego materiału wyizolowano DNA przy użyciu zestawu GeneMATRIX Bio-Trace DNA Purification Kit* (EurX).Badania genetyczne przeprowadzono w zakresie 21 polimorficznych loci DNA-STR: D10S1248. vWA. D16S539. D2S1338, D8S1179, D21S11. D18S51, D22S1045, D19S433, TH01, FGA, D2S441, D3S1358, D1S1656. D12S391, ACTBP2, D7S820, CSF1PO, D13S317, TPOX oraz D5S818 metodą enzymatycznej amplifikacji (PCR) w oparciu o zestawy multipleksowe .AmpFISTR NGMSEIect* oraz .AmpFISTR Identifiler Plus* (Applied Biosystems). Amplifikację DNA wykonano z wykorzystaniem termocyklera GeneAmp PCR System 9700 (Applied Biosystems). Frakcjonowanie zamplifikowanych fragmentów DNA przeprowadzono z wykorzystaniem automatycznego sekwenatora ABI Prism 3130x1 (Applied Biosystems). Ocenę długości fragmentów DNA i genotypowame przeprowadzono w oparciu o program komputerowy GeneMapper ID v.3.2.1, oceniający długość badanych fragmentów DNA i przyporządkowujący im nazwy na podstawie porównania z odpowiednim standardem długości i wzorcami allelicznymi. W oparciu o wyniki uzyskane z analizy polimorfizmu loci DNA-STR obliczono parametry charakteryzujące wartość dowodową przeprowadzonych badań: szansę ojcostwa - PI i prawdopodobieństwo ojcostwa - p (przy prawdopodobieństwie a priori 0.5). Obliczenia wykonano wykorzystując częstości alleliczne w poszczególnych loci oznaczone dla populacji polskiej i program komputerowy DNAStat 2.1.
WYNIKI BADAŃ:
Układ |
Osoba oznaczona jako |
Osoba oznaczona jako |
PI | ||
dziecko |
domniemany ojciec | ||||
D8S1179 |
8 |
14 |
13 |
14 |
1,250000 |
D21S11 |
27 |
30 |
29 |
niezgodność | |
D7S820 |
9 |
11 |
11 |
12 |
1,275510 |
CSF1PO |
9 |
11 |
10 |
11 |
0,871992 |
D3S1358 |
15 |
17 |
15 |
16 |
1,004016 |
TH01 |
9 |
9 |
7 |
9 |
2,520161 |
D13S317 |
11 |
12 |
11 |
11 |
1,301067 |
D16S539 |
11 |
12 |
9 |
12 |
0,759648 |
D2S1338 |
23 |
23 |
16 |
17 |
niezgodność |
D19S433 |
12 |
15 |
11 |
14,2 |
niezgodność |
vWA |
15 |
17 |
15 |
19 |
2,668090 |
TPOX |
12 |
12 |
8 |
8 |
niezgodność |
D18S51 |
21 |
24 |
11 |
16 |
niezgodność |
D5S818 |
14 |
15 |
11 |
12 |
1,390047 |
FGA |
15 |
16 |
23 |
24 |
1,838235 |
D10S1248 |
10 |
11 |
15 |
16 |
1,063830 |
D22S1045 |
16 |
18.3 |
15 |
16 |
1.601602 |
D2S441 |
20 |
22 |
10 |
11 |
2,062170 |
D1S1656 |
16 |
18.3 |
15 |
16 |
3,424658 |
D12S391 |
20 |
22 |
17 |
23 |
niezgodność |
| ACTBP2 |
17 |
19 |
19 |
27.2 |
3,246753 |
* - podkreślono tzw. .obce alicie' - warianty polimorfizmu występujące u osoby oznaczonej jako dziecko a nie 'występujące u osoby oznaczonej jako domniemany ojciec.
Wykonał: Sprawdził:
L. dz. 1234/16, IONA 567/16, dal deceree prywatne Wzór da P&-02 wyd. 3 z dnia 29-09-2014 r.
Strona 2 z 3