2795180028

4.3 Badania immunohistochemiczne

Badania immunohistochemiczne wykonano w Pracowni Immunologii zakładu Patologii Nowotworów Wielkopolskiego Centrum Onkologii. Do badań zastosowano następujące odczynniki i immunoreagenty:

I    Odczynniki:

1. TBS-sól fizjologiczna buforowana za pomocą Tris/HCL o pH 7,6 (Tris-Buffered Salinę firmy DAKO; Codę: SI968)

Przygotowanie: substancję przygotowaną przez firmę rozpuszczono w wodzie destylowanej do objętości 5 litrów.

1.    Bufor EDTA o pH 8,0; (Target Retriewal Solution 10x Concentrate; firmy DAKO; Codę S2367).

2.    Bufor Epitope Retrieval Solution 10x Concentrate o pH 6,0 (firmy DAKO;

Codę: K5204).

3.    DAB (3’3- diaminobenzydyna firmy DAKO; Codę K 3466).

Roztwór DAB-u przygotowano bezpośrednio przed użyciem.

4.    1 % roztwór albuminy, otrzymany przez rozpuszczenie w buforze TBS.

5.    Hematoksylina Mayer’a

6.    Pertex Mouting Medium firmy HistoLab; Nr 00811. Medium do zatapiania szkiełek nakrywkowych

II    Immunoreagenty

1.    Monoklonalne przeciwciało mysie przeciw E-cadherin;

Klon NCH-38; Nr katalogowy: M 3612 DAKO.

2.    Monoklonalne przeciwciało mysie przeciw BCL-2;

Klon 124; Nr katalogowy: M 0887 DAKO.

3.    Monoklonalne przeciwciało mysie przeciw Cytoketatin 5/6;

20