3870137023

102 S JANKOWSKI

sunięć chemicznych, nieliniowa zależność przesunięć chemicznych od temperatury, duża różnica populacji układu podlegającego wymianie.

Do obliczenia stałych szybkości służą programy iteracyjne [18].

2. WYKORZYSTANIE CZASÓW RELAKSACJI

Wykorzystanie czasów relaksacji w badaniach dynamiki stosunkowo małych cząsteczek organicznych zostało omówione w artykule przeglądowym [19]. Przedstawione tam metody obejmują badanie koalescencji czasów relaksacji T_x, pomiar zależności czasów relaksacji T₂ w funkcji częstości powtarzania impulsów metodą CPMG oraz zastosowanie czasów relaksacji T .

O wpływie procesów wymiany na wartość eksperymentalnej stałej T₂ wspomniano już wcześniej przy omawianiu metody pełnej analizy kształtu linii. Na podstawie przebiegu zależności r_2(eksp) od odstępu czasowego pomiędzy impulsami 180° można wyznaczyć stałe szybkości wymiany, z zakresu dostępnego dla metody analizy kształtu linii oraz szybszych. Podobny zakres szybkości można określać wykorzystując pomiar T , przy czym jest on prostszy w porównaniu z metodą opartą o pomiar T₂. Obie metody równocześnie zastosowano do wyznaczenia stałej dyso-cjacji kompleksu inhibitor - enzym [20], a więc układu składającego się z małej cząsteczki (ligand L) oraz makrocząsteczki M:

L + M s=s L-M    (12)

BA

Ogólne równanie opisujące zależność stałej T ma postać:

^_r = ft[“S^,(4)/7;^, + sm^J(A)/7;^r]+/>_b[cos^,(A)/7;^l' + sm¹(A)/7'_!'']

1P

^ Pt Pb sm^jACT²^ l(k\_m +G7\)]

gdzie cos(/?,) =    + Azzr|_L)^1/2 oraz sin^) = et_si /(Atu¹ + gt|_l)^,/2.

Indeksy f oraz b odnoszą się odpowiednio do formy wolnej i związanej. A(o~2n\v_{- ;rj, natomiast Aco^ określa różnicę przesunięcia /-tego jądra w stosunku do częstotliwości podstawowej.

Powyższą metodą określono stałą szybkości dysocjacji kompleksu tubercydyny i fosforylazy nukleozydu purynowego Escherichia coli. Wartości czasów T oraz T.

Z

wyznaczono w niezależnych eksperymentach, natomiast czasy T protonu H-l ’ li-gandu zmierzono dla różnych wartości pola ujarzmiającego spiny a>_sv Metodą najmniejszych kwadratów oszacowano wartości k = 2400±200 s^_I i A co = 110±5 s^_l

wym

(dla p_{/p_b = 10) oraz = 2050±200 s'¹ \Aco= 105±5 s’¹ (dla p /p = 40).