Biologia i Ekologia

Temat

ć

wiczenia: Budowa wybranych organizmów

ż

ywych - bakterie

Cze

ść

praktyczna

Cel

ć

wiczenia:

Zapoznanie si

ę

z morfologi

ą

komórek bakteryjnych (obserwacje mikroskopowe) i technikami

barwienia komórek. Scharakteryzowanie struktur komórkowych i ich funkcji.

Wyposa

ż

enie stanowiska:

- mikroskop (z powi

ę

kszeniem do 1000x),

- szkiełka podstawowe,
- palniki laboratoryjne,
- eza.

Materiały:

24-godzinna hodowla ró

ż

nego rodzaju bakterii na skosach lub płytkach agarowych.

Odczynniki do barwienia bakterii metod

ą

prost

ą

:

- bł

ę

kit metylenowy, : roztwór wodny 1,5%,

- woda destylowana,
- fiolet krystaliczny: roztwór 1% w 2% roztworze fenolu,
- fuksyna: roztwór wodny 1%,
- sól fizjologiczna.

Przebieg

ć

wiczenia

1. Przygotowanie preparatów – barwienie metod

ą

prost

ą

- Odtłu

ś

ci

ć

czyste szkiełko przedmiotowe pocieraj

ą

c je suchym mydłem, a nast

ę

pnie

wytrze

ć

do połysku such

ą

szmatk

ą

.

- Nanie

ść

na szkiełko kilka kropli soli fizjologicznej za pomoc

ą

jałowej ezy.

- Pobra

ć

niewielk

ą

ilo

ść

materiału z badanej hodowli bakteryjnej i rozprowadzi

ć

w soli

fizjologicznej tak, aby powstał cienki rozmaz.
- Wysuszy

ć

preparat w temperaturze pokojowej.

- Utrwali

ć

preparat przeci

ą

gaj

ą

c go 3-krotnie nad płomieniem palnika gazowego.

- Powierzchni

ę

preparatu zala

ć

wybranym barwnikiem i pozostawi

ć

na 2 minuty.

- Zla

ć

barwnik, spłuka

ć

wod

ą

destylowan

ą

, a nast

ę

pnie osuszy

ć

preparat bibuł

ą

.

2. Obserwacje mikroskopowe przygotowanych preparatów oraz wykonanie rysunków

Na przygotowany wybarwiony preparat nało

ż

y

ć

kropl

ę

olejku immersyjnego. Nast

ę

pnie ogl

ą

da

ć

pod mikroskopem w powi

ę

kszeniu 10x100 (pod imersj

ą

). Wykona

ć

rysunki.

Opracowanie wyników:

Sporz

ą

dzi

ć

rysunki ogl

ą

danych bakterii na podstawie preparatów obserwowanych pod

mikroskopem. Poda

ć

powi

ę

kszenie obrazu i umie

ś

ci

ć

dokładny opis wraz ze stosowan

ą

metod

ą

barwienia.


Literatura do

ć

wicze

ń

:

1. „Laboratorium z mikrobiologii ogólnej i

ś

rodowiskowej”, pod red. Mrozowskiej J.,

Wydawnictwo Politechniki

Ś

l

ą

skiej, str. 49-75,

2. „Mikrobiologia techniczna. Tom 1”, Libudzisz L., Kowal K.,

ś

akowska Z., Wydawnictwo

Naukowe PWN 2007, str. 19-43.