Wydział Chemiczny Politechniki Gdańskiej

Biologia Komórki - laboratorium

RAPORT Z WYKONANIA ĆWICZENIA

Tytuł ćwiczenia: Rozdzielanie komórek metodą wirowania

Imię i Nazwisko: Alicja Necel, Agnieszka Rotta, Maja Sołtyka, Robert Rosłan

Nr grupy laboratoryjnej: 4

Prowadzący ćwiczenie: Wioletta Januchta

Data zajęć: 22.12.2011r.

Obliczenie gęstości komórek 

Średnia liczba komórek żywych
Probówka: 1. 65szt; 2. 59szt; 3. 70szt
Średnia= (65+59+70)/3= 65szt.

Średnia liczba komórek martwych
Probówka: 1. 5szt; 2. 5szt; 3. 5szt
Średnia=(5+5+5)/3=5szt.

Do obliczenia gęstości komórek użyliśmy wzoru: $c = \frac{n}{v}$
c – gęstość [szt/ml]; n – średnia liczba komórek [szt]; v – objętość komory [ml]

v = 0,1mm³=0,0001ml
n­_żywych­= 65 szt
n_martwych= 5 szt

Liczba komórek w probówce jest 2 razy większa niż gęstość ponieważ pobraliśmy do wykonania ćwiczenia 2ml preparatu.

Komórki żywe:
c= 650 000 szt/ml
Suma komórek żywych w preparacie Σ=1 300 000 szt

Komórki martwe:
c= 50 000 szt/ml
Suma komórek martwych w preparacie Σ=100 000 szt

Komórki żywe + Komórki martwe = 1 400 000 szt
% Komórek martwych = 7,14%

Różnice pomiędzy komórkami żywymi, a martwymi.

Komórki żywe pod mikroskopem są duże, okrągłe lub owalne i mają regularne kształty, brzeg komórki jest gładki, niepostrzępiony. Użyte barwniki zabarwiają tylko otoczkę komórek i nie przenikają do środka.

Martwe komórki pod mikroskopem mają nieregularne kształty, ich ściana komórkowa jest postrzępiona, a użyte barwniki zabarwiają całą komórkę przenikając do cytoplazmy.
Komórki żywe i martwe mogą wymieszać się, przez co ciężko będzie je rozróżnić. Do zmieszania komórek żywych z martwymi może dojść poprzez nieprawidłowe odwirowanie preparatu, niepoprawne dodanie komórek do probówki w wyniku czego wymieszaniu ulegają warstwy Ficollu i zawiesiny komórek, przez co po odwirowaniu komórki będą rozproszone w całej objętości. Jeżeli preparat i odwirowanie przebiegło prawidłowo, to po tym w probówce powinna pojawić się biaława otoczka, którą stanowić będą żywe komórki, a na dnie probówki zbiorą się martwe komórki. Do zmieszania komórek może dojść podczas złej kolejności pobierania komórek z preparatu, przez co komórki mogą się wymieszać.