Budowa komórki
Budowa komórki
bakteryjnej
bakteryjnej
MORFOLOGIA
DROBNOUSTROJÓW
Opis komórki bakteryjnej
Opis komórki bakteryjnej
BADANIA MIKROSKOPOWE
BADANIA MIKROSKOPOWE
( mikroskopia )
( mikroskopia )
kształt, wielkość, ułożenie, sposób barwienia
kształt, wielkość, ułożenie, sposób barwienia
….
….
Preparat pośredni, bezpośredni
Preparat pośredni, bezpośredni
Metoda barwienia
Metoda barwienia
Morfologia komórek bakteryjnych
Morfologia komórek bakteryjnych
Klebsiella
Klebsiella
spp.
spp.
Kolonia - definicja
Kolonia - definicja
Tylko na podłożu stałym !!!!
widoczne gołym okiem skupisko bakterii składające się z miliardów
osobników;
kolonie rozwijają się najczęściej z pojedynczych komórek bakterii –
(klon bakterii).
BADANIA
BADANIA
MAKROSKOPOWE
MAKROSKOPOWE
Opis kolonii na podłożach stałych:
Opis kolonii na podłożach stałych:
KSZTAŁT; okrągły, owalny, nieregularny
KSZTAŁT; okrągły, owalny, nieregularny
WIELKOŚĆ; średnica w mm
WIELKOŚĆ; średnica w mm
BRZEG; równy, falisty, postrzępiony
BRZEG; równy, falisty, postrzępiony
POWIERZCHNIA; gładka, szorstka, matowa, błyszcząca
POWIERZCHNIA; gładka, szorstka, matowa, błyszcząca
WYNIOSŁOŚĆ PONAD POWIERZCHNIĘ; brak, wypukła, płaska, kopulasta
WYNIOSŁOŚĆ PONAD POWIERZCHNIĘ; brak, wypukła, płaska, kopulasta
ze środkiem wzniesionym w postaci guziczka, o wyniosłym brzegu i
ze środkiem wzniesionym w postaci guziczka, o wyniosłym brzegu i
zapadniętym środku
zapadniętym środku
KOLOR; zabarwienie kolonii, zabarwienie podłoża
KOLOR; zabarwienie kolonii, zabarwienie podłoża
KONSYSTENCJA; masłowata, sucha, skórzasta, śluzowata
KONSYSTENCJA; masłowata, sucha, skórzasta, śluzowata
ZAPACH; mydlany, kwaśny, drożdży, miodu, gnilny
ZAPACH; mydlany, kwaśny, drożdży, miodu, gnilny
ZAWIESZALNOŚĆ; (zdolność tworzenia jednolitej zawiesiny w r-rze soli
ZAWIESZALNOŚĆ; (zdolność tworzenia jednolitej zawiesiny w r-rze soli
fizjologicznej); łatwa lub nie
fizjologicznej); łatwa lub nie
INNE CECHY np. typ hemolizy na podłożu z krwią:
INNE CECHY np. typ hemolizy na podłożu z krwią:
Typ ß- całkowita liza wokół komórki
Typ ß- całkowita liza wokół komórki
Typ α- cząściowa liza (zazielenienie wokół kolonii)
Typ α- cząściowa liza (zazielenienie wokół kolonii)
Typ γ- brak hemolizy
Typ γ- brak hemolizy
KSZTAŁT KOMÓRKI
KSZTAŁT KOMÓRKI
KULISTY (ziarenkowce);
KULISTY (ziarenkowce);
pojedyncze
pojedyncze
pary (dwoinki)
pary (dwoinki)
skupiska (tetrady, sześcianki, nieregularne zgrupowania)
skupiska (tetrady, sześcianki, nieregularne zgrupowania)
łańcuszki
łańcuszki
CYLINDRYCZNY
CYLINDRYCZNY
pałeczki; głównie Gram(-)
pałeczki; głównie Gram(-)
laseczki; głównie Gram(+)
laseczki; głównie Gram(+)
SPIRALNY
SPIRALNY
krętki
krętki
śrubowce
śrubowce
przecinkowce
przecinkowce
POSTACI ROZGAŁĘZIONE (np. promieniowce)
POSTACI ROZGAŁĘZIONE (np. promieniowce)
KK. BAKTERYJNE O ZMIENNYM KSZTAŁCIE (pleomorfizm)
KK. BAKTERYJNE O ZMIENNYM KSZTAŁCIE (pleomorfizm)
KSZTAŁT KOMÓREK BAKTERYJNYCH
KSZTAŁT KOMÓREK BAKTERYJNYCH
Ziarniaki
Ziarniaki
Dwoinki
Dwoinki
Paciorkowce
Paciorkowce
Gronkowce
Gronkowce
Pakietowce
Pakietowce
Maczugowce
Maczugowce
Laseczki
Laseczki
Pałeczki
Pałeczki
Przecinkowce
Przecinkowce
Śrubowce
Śrubowce
Krętki
Krętki
Typ wzrostu na podłożach
Typ wzrostu na podłożach
płynnych
płynnych
tlenowce
mikroaerofile
fakultatywne
beztlenowce
beztlenowce
Typ wzrostu na podłożach
Typ wzrostu na podłożach
płynnych
płynnych
bezwzględne tlenowce
bezwzględne tlenowce
- do wzrostu wymagają tlenu
- do wzrostu wymagają tlenu
atmosferycznego (np.
atmosferycznego (np.
Micrococcus spp., Pseudomonas
Micrococcus spp., Pseudomonas
spp
spp
.)
.)
mikroaerofile
mikroaerofile
- wymagają tlenu jako końcowego
- wymagają tlenu jako końcowego
akceptora elektronów, jednak jego stężenie w
akceptora elektronów, jednak jego stężenie w
atmosferze powinno być obniżone (5% O2); nie rosną na
atmosferze powinno być obniżone (5% O2); nie rosną na
podłożach stałych w atmosferze tlenowej; w warunkach
podłożach stałych w atmosferze tlenowej; w warunkach
beztlenowych wzrastają bardzo słabo lub wcale (np.
beztlenowych wzrastają bardzo słabo lub wcale (np.
Helicobacter pylori
Helicobacter pylori
)
)
fakultatywne beztlenowce
fakultatywne beztlenowce
- mogą wzrastać zarówno
- mogą wzrastać zarówno
w warunkach tlenowych jak i beztlenowych (np.
w warunkach tlenowych jak i beztlenowych (np.
E. coli
E. coli
)
)
beztlenowce
beztlenowce
- nie są zdolne do wzrostu w warunkach
- nie są zdolne do wzrostu w warunkach
tlenowych
tlenowych
ściśle bezwzględne beztlenowce - tolerancja do 0,5% O2 w
ściśle bezwzględne beztlenowce - tolerancja do 0,5% O2 w
atmosferze (np.
atmosferze (np.
Clostridium haemolyticum
Clostridium haemolyticum
)
)
umiarkowane bezwzględne beztlenowce
umiarkowane bezwzględne beztlenowce
BUDOWA KOMÓRKI BAKTERYJNEJ
cytoplazma
nukleoid (DNA)
rybosomy
warstwy powierzchniowe
- błona cytoplazmatyczna
- ściana komórkowa
elementy dodatkowe
- otoczka
- rzęski, fimbrie
- przetrwalniki
- ziarnistości
- plazmidy, transpozony
1. Cytoplazma
1. Cytoplazma
(protoplazma)
(protoplazma)
stanowi środowisko procesów
stanowi środowisko procesów
komórkowych
komórkowych
zawiera H
zawiera H
2
2
O, jony nieorganiczne,
O, jony nieorganiczne,
niskocząsteczkowe metabolity,
niskocząsteczkowe metabolity,
wysokocząsteczkowe polimery kw.
wysokocząsteczkowe polimery kw.
nukleinowych, substancje zapasowe,
nukleinowych, substancje zapasowe,
białka, rybosomy
białka, rybosomy
Nukleoid (chromosom
Nukleoid (chromosom
bakteryjny)
bakteryjny)
komórka bakteryjna jest haploidem
komórka bakteryjna jest haploidem
składa się z genów strukturalnych i genów
składa się z genów strukturalnych i genów
regulatorowych
regulatorowych
zawiera podstawowe informacje genetyczne
zawiera podstawowe informacje genetyczne
dotyczące dla funkcjonowania komórki (tzw.
dotyczące dla funkcjonowania komórki (tzw.
chromosomalne czynniki dziedziczenia)
chromosomalne czynniki dziedziczenia)
DNA ma postać podwójnej spirali złożonej z
DNA ma postać podwójnej spirali złożonej z
komplementarnych łańcuchów, zwinięty jest w
komplementarnych łańcuchów, zwinięty jest w
kłębek i przyczepiony do mezosomu
kłębek i przyczepiony do mezosomu
(wpuklenia błony cytoplazmatycznej do
(wpuklenia błony cytoplazmatycznej do
mezosomu) lub do ściany komórkowej
mezosomu) lub do ściany komórkowej
replikacja nukleoidu odbywa się w sposób
replikacja nukleoidu odbywa się w sposób
semikonserwatywny (półzachowawczy)
semikonserwatywny (półzachowawczy)
Rybosomy
Rybosomy
zbudowane są z dwóch
zbudowane są z dwóch
podjednostek: dużej 50S (23S + 5S
podjednostek: dużej 50S (23S + 5S
RNA) i małej 30S (16S RNA)
RNA) i małej 30S (16S RNA)
zawierają 60% kw. nukleinowych i
zawierają 60% kw. nukleinowych i
40% białka
40% białka
mogą występować w postaci
mogą występować w postaci
polirybosomów (agregatów)
polirybosomów (agregatów)
stanowią centrum syntezy białek w
stanowią centrum syntezy białek w
komórce
komórce
Błona cytoplazmatyczna
Błona cytoplazmatyczna
ma grubość 2-8 nm
ma grubość 2-8 nm
zawiera 70% białek 30% fosfolipidów i
zawiera 70% białek 30% fosfolipidów i
niewielką ilość węglowodanów
niewielką ilość węglowodanów
posiada budową tzw. „płynno-mozaikową”
posiada budową tzw. „płynno-mozaikową”
(fosfolipidy stanowią podwójną warstwę, w
(fosfolipidy stanowią podwójną warstwę, w
którą wbudowane są białka)
którą wbudowane są białka)
występują w niej: nośniki lipidowe i enzymy
występują w niej: nośniki lipidowe i enzymy
(białka PBP) odgrywające rolę w biosyntezie
(białka PBP) odgrywające rolę w biosyntezie
peptydoglikanu (skł. śc. kom.) i podziale
peptydoglikanu (skł. śc. kom.) i podziale
komórki (tworzenie przegrody) oraz swoiste
komórki (tworzenie przegrody) oraz swoiste
receptory uczestniczące w transporcie cukru
receptory uczestniczące w transporcie cukru
lub aminokwasów przez błonę komórkową
lub aminokwasów przez błonę komórkową
Ściana komórkowa
Ściana komórkowa
posiada ją większość bakterii (nie występuje u form L bakterii i
posiada ją większość bakterii (nie występuje u form L bakterii i
u Mykoplazm)
u Mykoplazm)
jej głównym składnikiem jest peptydoglikan (mureina,
jej głównym składnikiem jest peptydoglikan (mureina,
mukopeptyd), który zbudowany jest z długich łańcuchów
mukopeptyd), który zbudowany jest z długich łańcuchów
polisacharydowych (z N-acetyloglokozoaminy i kw. N-
polisacharydowych (z N-acetyloglokozoaminy i kw. N-
acetylomuraminowego) połączonych z tetrapeptydowymi
acetylomuraminowego) połączonych z tetrapeptydowymi
łańcuchami aminokwasów
łańcuchami aminokwasów
posiada różną budowę u bakterii Gram (+) i Gram (-), co ma
posiada różną budowę u bakterii Gram (+) i Gram (-), co ma
związek z różnicą w barwieniu się bakterii metodą Grama
związek z różnicą w barwieniu się bakterii metodą Grama
u bakterii Gram (+) ma grubość 20-80nm, zawiera 60-100%
u bakterii Gram (+) ma grubość 20-80nm, zawiera 60-100%
peptydoglikanu, 0-2% lipidów, 3-4% aminokwasów, kwasy
peptydoglikanu, 0-2% lipidów, 3-4% aminokwasów, kwasy
tejchojowe (glicerolowy i rybitolowy), polisacharydy, białka,
tejchojowe (glicerolowy i rybitolowy), polisacharydy, białka,
czasami kwasy mykolowe (np. u
czasami kwasy mykolowe (np. u
Corynebacterium,
Corynebacterium,
Mycobacterium, Nocardia
Mycobacterium, Nocardia
)
)
u bakterii Gram (-) śc. kom.ma grubość 10-15 nm i ma bardziej
u bakterii Gram (-) śc. kom.ma grubość 10-15 nm i ma bardziej
złożoną budowę, zawiera 5-10% peptydoglikanu, 14-18%
złożoną budowę, zawiera 5-10% peptydoglikanu, 14-18%
aminokwasów, 1-20% lipidów. Składa się z trójwarstwowej
aminokwasów, 1-20% lipidów. Składa się z trójwarstwowej
(fosfolipidy, białka, lipopolisacharyd o złożonej budowie)
(fosfolipidy, białka, lipopolisacharyd o złożonej budowie)
pokrywy otaczającej cienką warstwę peptydoglikanu. Ponadto
pokrywy otaczającej cienką warstwę peptydoglikanu. Ponadto
występuje przestrzeń periplazmatyczna.
występuje przestrzeń periplazmatyczna.
peptydoglikan = mureina = mukopeptyd
polimer - N-acetyl glukozaminy (NAG) i kwasu N-acetyl muraminowego (NAM).
L-alanina
D-alanina*
Kwas D-glutaminowy*
Kwas diaminopimelinowy
(DPA)
GRAM POSITIVE
GRAM POSITIVE
GRAM NEGATIVE
GRAM NEGATIVE
Cytoplasm
Cytoplasm
Cytoplasm
Cytoplasm
Lipoteichoic acid
Peptidoglycan-teichoic acid
Cytoplasmic membrane
Inner (cytoplasmic) membrane
Outer Membrane
Lipopolysaccharide
Porin
Braun lipoprotein
P
e
ri
p
la
sm
ic
s
p
a
ce
Cytoplasm
Cytoplasm
Lipoteichoic
acid
Peptidoglycan-teichoic acid
Cytoplasmic membrane
GRAM POSITIVE CELL
GRAM POSITIVE CELL
ENVELOPE
ENVELOPE
Degradative enzyme
Mezosomy
Mezosomy
są utworzone przez wpuklenie błony
są utworzone przez wpuklenie błony
cytoplazmatycznej do wnętrza
cytoplazmatycznej do wnętrza
komórki
komórki
są miejscem przyczepu nukleoidu
są miejscem przyczepu nukleoidu
biorą udział w transporcie elektronów,
biorą udział w transporcie elektronów,
są miejscem syntezy kw. tłuszczowych
są miejscem syntezy kw. tłuszczowych
są odpowiednikami mitochondriów w
są odpowiednikami mitochondriów w
kom.
kom.
Eucaryota
Eucaryota
Otoczka
Otoczka
zbudowana z substancji o charakterze polimerów, najczęściej z
zbudowana z substancji o charakterze polimerów, najczęściej z
polisacharydów o niskim
polisacharydów o niskim
powinowactwie do barwników (niewidoczna w preparatach
powinowactwie do barwników (niewidoczna w preparatach
barwionych metodami rutynowymi)
barwionych metodami rutynowymi)
jej obecność można wykazać w barwieniu negatywowo-
jej obecność można wykazać w barwieniu negatywowo-
pozytywowym lub w testach serologicznych (odczyn
pozytywowym lub w testach serologicznych (odczyn
pęcznienia otoczek, odczyny aglutynacji lateksowej)
pęcznienia otoczek, odczyny aglutynacji lateksowej)
chroni komórkę przed wysychaniem, zwiększa
chroni komórkę przed wysychaniem, zwiększa
chorobotwórczość bakterii chroniąc przed fagocytozą,
chorobotwórczość bakterii chroniąc przed fagocytozą,
uczestniczy w adhezji, jest nieprzepuszczalna dla antybiotyków
uczestniczy w adhezji, jest nieprzepuszczalna dla antybiotyków
jest dobrym antygenem indukującym powstawanie przeciwciał,
jest dobrym antygenem indukującym powstawanie przeciwciał,
które uczestniczą w niszczeniu bakterii
które uczestniczą w niszczeniu bakterii
obecność jej w kom. bakterii kodowana jest genetycznie, ale
obecność jej w kom. bakterii kodowana jest genetycznie, ale
może zależeć również od warunków środowiskowych
może zależeć również od warunków środowiskowych
występuje m.in. u szczepów:
występuje m.in. u szczepów:
Klebsiella pneumoniae,
Klebsiella pneumoniae,
Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumonice
Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumonice
Otoczka
Otoczka
Rzęski
Rzęski
długie, puste w środku filamenty (nici), zakotwiczone w
długie, puste w środku filamenty (nici), zakotwiczone w
błonie cytoplazmatycznej za pomocą haczyka i
błonie cytoplazmatycznej za pomocą haczyka i
pierścieni (tzw. ciałko podstawne, u bakterii Gram (+) –
pierścieni (tzw. ciałko podstawne, u bakterii Gram (+) –
jedna para pierścieni, u Gram (-) – dwie pary)
jedna para pierścieni, u Gram (-) – dwie pary)
zbudowane ze spiralnie zwiniętego białka – flageliny,
zbudowane ze spiralnie zwiniętego białka – flageliny,
które jest immunogenem
które jest immunogenem
występują u prawie wszystkich bakterii spiralnych,
występują u prawie wszystkich bakterii spiralnych,
wielu laseczek i pałeczek oraz niektórych ziarenkowców
wielu laseczek i pałeczek oraz niektórych ziarenkowców
ich wytwarzanie jest cecha gatunkową, która może być
ich wytwarzanie jest cecha gatunkową, która może być
utracona w wyniku mutacji lub nieodpowiednich
utracona w wyniku mutacji lub nieodpowiednich
warunków środowiska (np. zbyt wysoka temp. hodowli)
warunków środowiska (np. zbyt wysoka temp. hodowli)
są organem umożliwiającym poruszanie się bakterii, co
są organem umożliwiającym poruszanie się bakterii, co
widoczne jest jako pełzanie po podłożach stałych,
widoczne jest jako pełzanie po podłożach stałych,
zmętnienie w podłożach płynnych)
zmętnienie w podłożach płynnych)
Fimbrie (pili)
Fimbrie (pili)
nitkowate wyrostki widoczne w mikr. elektronowym,
nitkowate wyrostki widoczne w mikr. elektronowym,
proste i krótsze niż rzęski, zbudowane z białka – piliny
proste i krótsze niż rzęski, zbudowane z białka – piliny
występują z nielicznymi wyjątkami (
występują z nielicznymi wyjątkami (
Streptococcus
Streptococcus
spp
spp
.,
.,
Corynebacterium
Corynebacterium
spp.) tylko u Gram(-) bakterii !!!
spp.) tylko u Gram(-) bakterii !!!
typy fimbrii:
typy fimbrii:
zwykłe –
zwykłe –
zbudowane z białka należącego do lektyn, biorą udział w
zbudowane z białka należącego do lektyn, biorą udział w
adhezji do nabłonków, są wyznacznikami chorobotwórczości,
adhezji do nabłonków, są wyznacznikami chorobotwórczości,
kodowane plazmidowo lub chromosomalnie, występują u G(-)
kodowane plazmidowo lub chromosomalnie, występują u G(-)
pałeczek z rodziny
pałeczek z rodziny
Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa,
Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa,
Haemophilus influenzae
Haemophilus influenzae
oraz u dwoinek rzeżączki (
oraz u dwoinek rzeżączki (
Neisseria
Neisseria
gonorrhoeae
gonorrhoeae
)
)
płciowe
płciowe
- kodowane przez geny zawarte na plazmidach, posiadają
- kodowane przez geny zawarte na plazmidach, posiadają
kanał umożliwiający przenoszenie chromosomalnego,
kanał umożliwiający przenoszenie chromosomalnego,
plazmidowego, transpozonowego, bakteriofagowego DNA (tą droga
plazmidowego, transpozonowego, bakteriofagowego DNA (tą droga
mogą być przekazywane geny oporności na antybiotyki oraz geny
mogą być przekazywane geny oporności na antybiotyki oraz geny
warunkujące zjadliwość bakterii)
warunkujące zjadliwość bakterii)
są pełnowartościowymi antygenami i silnymi immunogenami
są pełnowartościowymi antygenami i silnymi immunogenami
Fimbrie (pili)
Fimbrie (pili)
Przetrwalniki
Przetrwalniki
(endospory)
(endospory)
wytwarzane są przez 150 gatunków drobnoustrojów głównie
wytwarzane są przez 150 gatunków drobnoustrojów głównie
niechorobotwórczych jak i chorobotwórczych (laseczki
niechorobotwórczych jak i chorobotwórczych (laseczki
Bacillus
Bacillus
spp
spp
., Clostridium
., Clostridium
spp.)
spp.)
ich rozmieszczenie i wielkość jest ważną cechą taksonomiczną
ich rozmieszczenie i wielkość jest ważną cechą taksonomiczną
mogą być rozmieszczone centralnie, biegunowo lub
mogą być rozmieszczone centralnie, biegunowo lub
podbiegunowo w komórce bakterii
podbiegunowo w komórce bakterii
pozwalają przetrwać niekorzystne warunki środowiska (np.
pozwalają przetrwać niekorzystne warunki środowiska (np.
brak wody, składników odżywczych, działanie promieniowania
brak wody, składników odżywczych, działanie promieniowania
UV, wysokiej temperatury)
UV, wysokiej temperatury)
„
„
pauza metaboliczna”
pauza metaboliczna”
sporulacja
sporulacja
– wieloetapowy proces tworzenia przetrwalników w
– wieloetapowy proces tworzenia przetrwalników w
komórce bakteryjnej polegający na zagęszczaniu cytoplazmy
komórce bakteryjnej polegający na zagęszczaniu cytoplazmy
wokół nukleoidu, tworzeniu błony cytoplazmatycznej, warstwy
wokół nukleoidu, tworzeniu błony cytoplazmatycznej, warstwy
peptydoglikanowej, osłon otaczających przetrwalniki
peptydoglikanowej, osłon otaczających przetrwalniki
germinacja
germinacja
– kiełkowanie przetrwalników przeniesionych do
– kiełkowanie przetrwalników przeniesionych do
odpowiednich warunków
odpowiednich warunków
są oporne na ogrzewanie – giną dopiero w autoklawie przy
są oporne na ogrzewanie – giną dopiero w autoklawie przy
temp. 121ºC
temp. 121ºC
Przetrwalniki
Przetrwalniki
(endospory)
(endospory)
cortex
cortex
The endospore
The endospore
exosporium
exosporium
coat
coat
Inner
Inner
membrane
membrane
outer
outer
membrane
membrane
Ciałka wtrętowe
Ciałka wtrętowe
(ziarnistości
(ziarnistości
cytoplazmatyczne)
cytoplazmatyczne)
stanowią zapasowe substancje
stanowią zapasowe substancje
odżywcze, które mogą być otoczone
odżywcze, które mogą być otoczone
cienką błoną, umiejscowione w
cienką błoną, umiejscowione w
cytoplazmie lub zapasowe źródło energii
cytoplazmie lub zapasowe źródło energii
często utworzone z polimerów kw. β-
często utworzone z polimerów kw. β-
hydroksymasłowego lub z
hydroksymasłowego lub z
nieorganicznych polifosforanów (ciała
nieorganicznych polifosforanów (ciała
wolutynowe), występujących np. u
wolutynowe), występujących np. u
Corynebacterium diphteriae
Corynebacterium diphteriae
(ciałka
(ciałka
Ernst-Babesa)
Ernst-Babesa)
Pozachromosomalne
Pozachromosomalne
czynniki dziedziczenia
czynniki dziedziczenia
Plazmidy
Plazmidy
– koliste cząsteczki DNA,
– koliste cząsteczki DNA,
ulegające autonomicznej replikacji
ulegające autonomicznej replikacji
niezależnie od nukleoidu; mogą zawierać
niezależnie od nukleoidu; mogą zawierać
informacje dotyczące cech, które zwiększają
informacje dotyczące cech, które zwiększają
możliwość przeżycia kom. bakteryjnej w
możliwość przeżycia kom. bakteryjnej w
określonych warunkach środowiskowych, w
określonych warunkach środowiskowych, w
tym także geny kodujące lekooporność
tym także geny kodujące lekooporność
Transpozony
Transpozony
– fragmenty DNA mogące
– fragmenty DNA mogące
ulegać translokacji w niezmienionym stanie
ulegać translokacji w niezmienionym stanie
i włączać się w nowe miejsca w DNA; mogą
i włączać się w nowe miejsca w DNA; mogą
zawierać geny determinujące oporność na
zawierać geny determinujące oporność na
chemioterapeutyki
chemioterapeutyki
Przekazywanie DNA między
Przekazywanie DNA między
bakteriami
bakteriami
Koniugacja
Koniugacja
–
–
czasowe połączenie dwóch typów komórek:
czasowe połączenie dwóch typów komórek:
dawców F+ i biorców F-.
dawców F+ i biorców F-.
Plazmid z komórki dawcy zawierający czynnik F zostaje włączony do
Plazmid z komórki dawcy zawierający czynnik F zostaje włączony do
chromosomu bakterii biorcy. Powstaje kom. Hfr z wbudowanym
chromosomu bakterii biorcy. Powstaje kom. Hfr z wbudowanym
genomem bakteryjnym i czynnikiem F, który może się z czasem uwolnić.
genomem bakteryjnym i czynnikiem F, który może się z czasem uwolnić.
W ten sposób bakterie nabywają oporność na czynniki antybakteryjne
W ten sposób bakterie nabywają oporność na czynniki antybakteryjne
Transformacja
Transformacja
–
–
umierająca bakteria uwalnia w sposób ciągły
umierająca bakteria uwalnia w sposób ciągły
DNA, który może być wychwycony, strawiony i zintegrowany przez inną
DNA, który może być wychwycony, strawiony i zintegrowany przez inną
komórkę bakteryjną. Transformacyjny DNA zmienia komórkę biorcy;
komórkę bakteryjną. Transformacyjny DNA zmienia komórkę biorcy;
może być chromosomalny i plazmidowy, może zawierać informacje
może być chromosomalny i plazmidowy, może zawierać informacje
kodujące czynniki zjadliwości bakterii (geny egzotoksyn, adhezyn,
kodujące czynniki zjadliwości bakterii (geny egzotoksyn, adhezyn,
czynników inwazyjności)
czynników inwazyjności)
Transdukcja
Transdukcja
– przekazanie DNA z jednej komórki
– przekazanie DNA z jednej komórki
bakteryjnej do drugiej odbywa się przez wirusy bakteryjne zwane
bakteryjnej do drugiej odbywa się przez wirusy bakteryjne zwane
bakteriofagami, które mogą niszczyć kom. bakteryjną (zakażenie
bakteriofagami, które mogą niszczyć kom. bakteryjną (zakażenie
wirulentne = lityczne) lub pozostawiać ją żywą z dodatkowym
wirulentne = lityczne) lub pozostawiać ją żywą z dodatkowym
zestawem genów należących do włączonych fagów (profagów)
zestawem genów należących do włączonych fagów (profagów)
(zakażenie umiarkowane = lizogenne).
(zakażenie umiarkowane = lizogenne).
Charakterystyka bakteryjnych endotoksyn i egzotoksyn
Charakterystyka bakteryjnych endotoksyn i egzotoksyn
Właściwości
ENDOTOKSYNY
EGZOTOKSYNY
Struktura chemiczna
Lipopolisacharyd (m.cz.=
10kDa)
Białka (m.cz.= 50-
1000kDa)
Związek z komórką
Składnik błony zewnętrznej
Pozakomórkowe
Denaturacja w 100 C
Nie
Zwykle tak
Antygenowość
Tak
Tak
Toksoid
Nie
Tak
Siła działania
Zwykle niska >100ug
Zwykle wysoka 1 ug
Swoistość
Niska
Wysoka
Aktywność
enzymatyczna
Nie
Zwykle tak
Pirogenność
Tak
Rzadko
A-B toxins
A-B toxins
Active
Active
Binding
Binding
A
A
Cell surface
Cell surface
B
B
Barwienie
Bakterie prawie nie załamują światła,
Bakterie prawie nie załamują światła,
w związku z tym aby je uwidocznić
w związku z tym aby je uwidocznić
trzeba użyć barwnych związków
trzeba użyć barwnych związków
chemicznych –
chemicznych –
barwników
barwników
:
:
kwaśne służą zazwyczaj do barwienia
kwaśne służą zazwyczaj do barwienia
cytoplazmy oraz składników pozakomórkowych
cytoplazmy oraz składników pozakomórkowych
zasadowe
zasadowe
(auramina, błękit metylenowy,
(auramina, błękit metylenowy,
czerwień obojętna, fiolet krystaliczny, fuksyna
czerwień obojętna, fiolet krystaliczny, fuksyna
zasadowa) wybarwiają głównie struktury
zasadowa) wybarwiają głównie struktury
jądrowe.
jądrowe.
Barwienie
Preparat wykonujemy:
Preparat wykonujemy:
a) z materiału pobranego od chorego –
a) z materiału pobranego od chorego –
preparat bezpośredni,
preparat bezpośredni,
b) z 18-24h hodowli drobnoustrojów –
b) z 18-24h hodowli drobnoustrojów –
preparat pośredni.
preparat pośredni.
Techniki barwienia
Techniki barwienia
proste pozytywne
proste pozytywne
1 barwnik
1 barwnik
złożone pozytywne
złożone pozytywne
2 barwniki
2 barwniki
negatywne
negatywne
nigrozyna, tusz chiński
nigrozyna, tusz chiński
pozytywno-negatywne
pozytywno-negatywne
nigrozyna,
nigrozyna,
tusz chiński + barwnik zasadowy
tusz chiński + barwnik zasadowy
specjalne
specjalne
wizualizacja
wizualizacja
dodatkowych struktur komórki np.:
dodatkowych struktur komórki np.:
barwienie rzęsek, ściany komórkowej,
barwienie rzęsek, ściany komórkowej,
błony cytoplazmatycznej.
błony cytoplazmatycznej.
Przygotowanie preparatu do
Przygotowanie preparatu do
barwienia
barwienia
przygotowanie rozmazu na szkiełku
przygotowanie rozmazu na szkiełku
podstawowym - kropla 0,85%NaCl + 1
podstawowym - kropla 0,85%NaCl + 1
kolonia bakteryjna
kolonia bakteryjna
wysuszenie
wysuszenie
(ogrzanie nie wyschniętego
(ogrzanie nie wyschniętego
preparatu powoduje uszkodzenie komórki)
preparatu powoduje uszkodzenie komórki)
utrwalenie preparatu
utrwalenie preparatu
(zabicie komórek,
(zabicie komórek,
częściowa denaturacja struktur
częściowa denaturacja struktur
komórkowych
komórkowych
przeciwdziała zmyciu
przeciwdziała zmyciu
preparatu podczas barwienia, ułatwia
preparatu podczas barwienia, ułatwia
wnikanie barwnika):
wnikanie barwnika):
metody fizyczne i
metody fizyczne i
chemiczne
chemiczne
3-4 krotne w płomieniu palnika
3-4 krotne w płomieniu palnika
Bakterie
Gram-dodatnie
Bakterie
Gram-ujemne
Schemat barwienia bakterii metodą Grama
Utrwalenie
preparatu
Fiolet krystaliczny
Płyn Lugola
Odbarwienie
roztworem
alkoholu
Fuksyna zasadowa