1. Porównaj hodowlę pierwotną z linią komórkową.
2. Wymieo znane Ci metody określania poliferencji hodowli.
3. Opisz fazy wzrostu hodowli.
4. Wymieo rodzaje hodowli.
5. Opisz metodÄ™ hodowli na granicy faz (Trowela).
1. Porównaj hodowlę pierwotną z linią komórkową.
Hodowla pierwotna: zakładana jest z materiału pobranego bezpośrednio z organizmu; rodzaje:
komórkowe, tkankowe, narządowe (organotypowe), inżynieria tkankowa.
·ð komórki bliższe stadium in vivo,
·ð bardziej zależne od czynników wzrostowych i matrix pozakomórkowego,
·ð lepsze do badania interakcji komórkowych,
Linia komórkowa: populacja komórek powstająca z hodowli pierwotnej po pierwszym pasażu
pasażowaniem nazywamy przeniesienie komórek z dotychczasowego naczynia hodowlanego do
nowego; poddaje się mu komórki przed osiągnięciem konfluencji. Podczas pasażowania rozcieocza
się komórki w odpowiednim stosunku i przenosi do nowych naczyo. W ten sposób namnaża się
populację komórek oraz zapewnia ciągłośd jednolitego materiału do badao. Po trzecim pasażu zwykle
linia staje się stabilna (komórki mają określone tempo proliferacji).
·ð Å‚atwa dostÄ™pnoÅ›d dużej iloÅ›ci materiaÅ‚u,
·ð lepiej zdefiniowane i scharakteryzowane,
·ð szybko proliferujÄ…,
·ð mniejsza różnica miÄ™dzy eksperymentami,
·ð nie ma potrzeby zabijania zwierzÄ™cia.
2. Wymieo znane Ci metody określania proliferacji hodowli:
Mikroskopowe?
3. Opisz fazy wzrostu hodowli.
Fazy wzrostu komórek w hodowli in vitro
Cykl komórkowy dzieli się na fazy: G1- synteza RNA, białek, wzrost komórki, S- replikacja DNA, G2-
przygotowanie do podziału M0 podział komórkowy
1. Faza lag - rozpoczyna się po posianiu komórek i jest to kres adaptacji komórek -w przypadku
hodowli rosnących w zawiesinie, nie ma tej fazy, -komórki odbudowują elementy glikokaliksu
zniszczone przez trypsynę, -przyczepiają się do podłoża i rozpłaszczają -nie dzielą się a liczba ich może
nawet się zmniejszad, bo częśd komórek zniszczonych nie przyczepia się, -wzrasta ilośd enzymów,
głównie polimeraz DNA, -komórki wchodzą w fazę G1
2. Faza log -faza logarytmicznego wzrostu, -jest to okres największego wzrostu liczby komórek, dzielą
się one intensywnie, w czasie mitoz odrywają się od podłoża, a po podziale ponownie się
przyczepiajÄ…,
-faza kooczy się jednym lub dwoma podwojeniami populacji komórek osiągających konfluencję, -
komórki cechuje wysoka żywotnośd i wysokie tempo metabolizmu, -długośd fazy zależy od gęstości
wyjściowej hodowli, -komórki przechodzą poszczególne fazy cyklu komórkowego, - wygląd komórek
bada się pod mikroskopem świetlnym lub kontrastowo-fazowym (żywe)
3. Faza plateau  faza stacjonarna -komórki osiągają konfluencję i przestają się dzielid, cała dostępna
powierzchnia naczynia jest zajęta, -dochodzi do zahamowania i kontaktowego zahamowania wzrostu
-początkowo ilośd komórek się już nie zmienia, a potem zaczynają umierad, sporadycznie obserwuję
się jeszcze podziały komórkowe
4. Wymieo rodzaje hodowli.
Typy hodowli in vito:
·ð hodowle tkanek (tissue)
·ð hodowla wszystkich elementów pochodzÄ…cych z tkanki  eksplanty.
·ð hodowle narzÄ…dów (organ culture)- hodowle caÅ‚ych narzÄ…dów,
·ð hodowle komórek ( cell culture)  hodowle komórek zdyspersowanych
·ð hodowla histotypowa- (histotypic culture)- hodowla komórek na elementach macierzy 
pozakomórkowa, reagregujące i odtwarzające strukturę tkanki.
Klasyfikacja ze względu na pochodzenie komórek i czas trwania:
·ð hodowle pierwotne - pierwszorzÄ™dowe,
·ð pierwotne linie komórkowe
·ð ustalone linie komórkowe (transformowane linie komórkowe), inaczej: linie
unieśmiertelnione: onkogeny, onkowirusy, nowotwory
5. Opisz metodÄ™ hodowli na granicy faz (Trowela).
Hodowla organotypowa na granicy faz- metoda Trowella -jeden z wymiarów tkanki/organu nie
może przekraczad 1 mm -czas hodowli 48 godzin
Przygotowad płytki 6-dołkowe, lub małe szalki. Umieścid w dołku siateczkę ze stali nierdzewnej,
pokryd ją papierem soczewkowym i dodad 2,5 (lub 3) ml pożywki Parkera. Jajniki umieścid na szalkach
manipulacyjnych zwilżonych pożywką Parkera. Wypreparowad pęcherzyki przy użyciu nożyczek,
usunąd resztki tkanki łącznej. Pęcherzyki przenieśd na przygotowane siateczki. Hodowla w 37 st. C.