Kierunek/ specjalność:TŻ Nr grupy: |
Imię i nazwisko: | Nazwisko prowadzącego: dr Barbara Mickowska |
Data wykonania ćwiczenia: 10.12.2014 |
Tytuł ćwiczenia: Elektroforeza kapilarna |
Data oddania sprawozdania: 14.01.2015 |
Wstęp teoretyczny
Elektroforeza - technika w której wykorzystywane są zjawiska poruszania się cząstek obdarzonych ładunkiem w polu elektrycznym w kierunku elektrody o przeciwnym znaku.
Elektroforeza kapilarna - służy najczęściej do rozdziału bardzo małych cząstek. Rozdział następuje w długiej i cienkiej kwarcowej kapilarze, wypełnionej buforem. W metodzie tej ważne są cząstki, które poruszają się z różną prędkością i ruchliwością. Podstawą rozdziału w tej metodzie jest właśnie różnica w ruchliwości elektroforetycznej oznaczanych analitów, co powoduje, że jony w polu elektrycznym poruszają się z różną prędkością.
Cel ćwiczenia: Oznaczenie wybranych witamin grupy B(pirydoksyna) w preparacie
multiwitaminowym. Analiza ilościowa metodą dodatku wzorca.
Opracowanie:
Mamy wzorzec o stężeniu 1mg/ml,
Deklarowane stężenie widniejące na etykiecie wynosi: 4mg/ml
Próbkę rozcieńczono 100x. Do 100 μl roztworu próbki dodano kolejno 5, 10 i 15 μl roztworu wzorca.
Stężenia roztworów wzorcowych:
5μg − 105μl
x − 1000μl
x = 47, 6 μg/ml
10μg − 110μl
x − 1000μl
x = 90, 9 μg/ml
15μg − 115μl
x − 1000μl
x = 130, 4 μg/ml
Stężenie dodatku wzorca[μg/ml] | Pole powierzchni piku |
0 | 0,0000702 |
47,6 | 0,0001635 |
90,9 | 0,00025139 |
130,4 | 0,00032235 |
OBLICZENIA:
y=2*10-6x+0,0000702
0=2*10-6x+0,0000702 /2
0=10-6x+0,0000702 /-10-6
-10-6x=0,0000702
x= -70,2
Wartość bezwzględna x=|70,2|
Stężenie rozcieńczone było 100 razy, więc 70,2 μg/ml *100= 7020μg = 7 mg/ml$x = \frac{100\mu g}{\text{ml}}*100 = \frac{10000\mu g}{\text{ml}}$
Obliczenie błędu względnego:
x = x − x0
x = 7 − 4
x=3
$$\left| \text{δx} \right| = \frac{\left| x \right|}{\left| x_{0} \right|}*100\%$$
$$\left| \text{δx} \right| = \frac{3}{4}*100\%$$
δx = 75%
Wnioski: W powyższym ćwiczeniu błąd względny wykonanej analizy wynosi 75%. Jest to duży błąd wynikający z braku precyzji i należytej staranności w wykonaniu tego ćwiczenia co jest niezwykle ważne przy korzystaniu z aparatu do elektroforezy kapilarnej.