FIZJOLOGIA ROŚLIN

Sprawozdanie

Ćwiczenie nr 7	Katarzyna Antoniewska	Grupa nr 3
Data wykonania: 18.04.2011	TEMAT ĆWICZENIA: Pomiary natężeń fotosyntezy.	ZALICZENIE:
Data oddania: 09.05.2011

ĆWICZENIE I

Pomiar natężenia fotosyntezy i oddychania za pomocą respirometru Warburga.

Wstęp:

Odmierzono do wszystkich naczynek reakcyjnych po 10ml buforu węglanowego. Odważono 4 porcje mchu jawajskiego (po 0,2g świeżej masy) i umieszczono w naczyńkach nr 2-5. Naczynko nr 1 jest termobarometrem. Szlify bocznych odgałęzień manometrów i bocznych ramion naczyniek nasmarowano wazeliną. Zamocowano za pomocą recepturek i umieszczono w łaźni wodnej w temp. 25^OC. Sprawdzono szczelność respirometru zamykając układ kranem trójdrożnym i podnosząc ciśnienie w manometrze. Postała różnica poziomów cieczy w ramionach manometru utrzymywała się na stałym poziomie. Przy otwartych kranach włączono mechanizm wstrząsający oraz lampy i inkubowano rośliny przez ok. 15 min. Doprowadzono poziom płynu Brodiego w zamkniętym ramieniu do poziomu „zerowego”, zamknięto kran trójdrożny i odczytano poziom cieczy w otwartym ramieniu manometru. Czynność powtórzono. Następnie wykonano analogicznie ćwiczenie w warunkach ciemności, poprzez szczelne owinięcie naczyniek reakcyjnych folią.

Obliczenia:

Wyniki:

Pomiary na świetle

nr manometru	stała manometryczna(k)	Czas [min]	Odczyt manometru [mm]	Zmiany poziomu płynu Brodiego w stosunku do odczytu poprzedniego [mm]	Średnia wydzielona objętość tlenu w czasie (na godzinę)
				Od odczytu poprzedniego [h1]	a lub b= h1 x k
1 2 3 4 5	1,02 1,05 1,00 0,97 0,99	11,5	t0 t1 154 175 152 181 151 177 151 178 153 178	21 29 26 27 25	21,42 30,45 26,00 26,19 24,75
1 2 3 4 5	1,02 1,05 1,00 0,97 0,99	12	t2 175 186 184 195 179	21 34 33 44 27	21,42 35,7 33,00 48,68 26,73

Pomiary w ciemności

nr manometru	stała manometryczna(k)	Czas [min]	Odczyt manometru [mm]	Zmiany poziomu płynu Brodiego w stosunku do odczytu poprzedniego [mm]	Średnia wydzielona objętość tlenu w czasie
				Od odczytu poprzedniego [h1]	a lub b= h1 x k
1 2 3 4 5	1,02 1,05 1,00 0,97 0,99	13,5	t0 t1 154 137 152 133 151 132 151 128 153 129	17 19 19 23 24	17,34 19,95 19,00 22,31 23,76

Wnioski:

Fotosynteza rzeczywista, jest zawsze większa niż pozorna. Np.:

Fotosynteza pozorna (w świetle)

28,33 + 65,6 / 2 = 46,965

Oddychanie (w ciemności): 17,3

Fotosynteza rzeczywista:64,265

ĆWICZENIE II

Reakcja Hilla na izolowanych chloroplastach.

Wstęp:

Sporządzono 0,34M roztwór sacharozy. Odważono ok. 10g liści szpinaku, umyto i usunięto grubsze żyłki. Liście pocięto na drobne kawałki, zalano 100ml przyrządzonego roztworu i homogenizowano przez ok. minutę, a otrzymaną zawiesinę przefiltrowano przez gazę. Do dwóch probówek odlano równe ilości zawiesiny oraz dodano identyczne ilości (po ok. 0,5-1ml) indofenolu. Probówkę nr 1 szczelnie owinieto folią, a probówkę nr 2 umieszczono w silnym świetle.

Wyniki:

Warunki	Barwa początkowa	Barwa końcowa
Światło	Ciemnogranatowa	Zielona
Ciemność	Ciemnogranatowa	ciemnogranatowa

Indofenol + 2H₂O --- > Indofenol-2H + O₂

Wnioski:

Indofenol, będący sztucznym akceptorem elektronów ulega redukcji do bezbarwnego indofenol-2H w probówce w której zachodzi jasna faza fotosynteza. Natomiast w probówce inkubowanej w ciemności, gdzie nie zachodzi jasna faza fotosyntezy nie zachodzi redukcja i brak odbarwienia.

ĆWICZENIE III

Próba Sachsa

Wstęp

Liście trzykrotki zasłonięto szczelnie do połowy folią aluminiową i oświetlano intensywnym światłem przez kilka dni. Po naświetlaniu zdjęto folię, zagotowano liście w łaźni wodnej w zlewce z wodą,a następnie w etanolu – w celu usunięcia barwników. Odbarwiony liść zalano płynem Lugola.

Wnioski:

W części górnej, która była zasłonięta obserwujemy jasną barwę. Nie uległa ona odbarwieniu w płynie Lugola, co świadczy o braku asymilacji skrobi.

W części dolnej, wystawionej na świetle obserwujemy barwę ciemną. Uległa ona odbarwieniu w płynie Lugola, więc skrobia została zgromadzona.

A więc, skrobia jest gromadzona tylko w miejscach, gdzie zachodzi proces fotosyntezy.