Ćwiczenie nr 1
Temat: Mikrobiologiczna analiza jakości powietrza
Data wykonania ćwiczenia: 26. 02. 2014
Data odczytu: 05. 03. 2014
Sekcja I:
BIENIEK Anna
SERAFIMOWICZ Weronika
STĄPOREK Milena
Cel ćwiczenia
Celem ćwiczenia było określenie liczebności bakterii pigmentujących i niepigmentujących oraz grzybów w powietrzu. Punkt poboru stanowiło pomieszczenie sterylne, zlokalizowane w budynku „Polimerów” Politechniki Śląskiej.
Metody badań
Powietrze z pomieszczenia sterylnego w budynku „Polimerów”.
Agar odżywczy przygotowany wg PN 89/Z-04111/02 na płytkach Petriego (wystawiony na działanie powietrza przez 10 min).
Pożywka Czapek-Doxa wg PN 89/Z-04111/03 na płytkach Petriego (wystawiony na działanie powietrza przez 10 min).
Inkubacja hodowli bakterii na podłożu z agarem odżywczym i hodowli grzybów na podłożu Czapek-Doxa w temperaturze pokojowej przez 7 dni.
Zliczanie kolonii bakterii i grzybów widocznych „gołym okiem” po tygodniu inkubacji.
Liczba bakterii w 1m3 powietrza liczona była według wzoru Omeliańskiego w modyfikacji Gogoberidze:
$$X = 5*10^{4}\ \frac{c}{\pi*r^{2}*t}$$
Gdzie:
X- liczba bakterii/zarodników grzybów w 1m3 powietrza [dla bakterii cfu/m3, dla grzybów propagul/m3],
c- średnia liczba kolonii na płytce,
r- promień płytki Petriego stosowanej w badaniach [cm],
t- czas ekspozycji [min],
5*104- współczynnik przeliczeniowy dla uzyskanej liczby mikroorganizmów w 1m3 powietrza
Karta pomiarowa z parafką prowadzącego dołączona do sprawozdania.
Przeliczenia:
a)
$$\mathbf{X = 5*}\mathbf{10}^{\mathbf{4}}\mathbf{\ }\frac{\mathbf{c}}{\mathbf{\pi*}\mathbf{r}^{\mathbf{2}}\mathbf{*t}}$$
* średnica szalki Petriego, na której znajdowały się kolonie bakterii wynosiła d=9cm
Średnica szalki Petriego, na której znajdowały się kolonie grzybów wynosiła d=10cm
Liczebność bakterii saprofitycznych w 1m3 powietrza (suma pigmentujących i niepigmentujących):
$$5*10^{4}\frac{12,5}{3,14*\left( 4,5 \right)^{2}*10} = 982,9\ \left\lbrack \frac{\text{cfu}}{m^{3}} \right\rbrack$$
Liczebność bakterii pigmentowych w 1m3 powietrza:
$$5*10^{4}\frac{8,5}{3,14*\left( 4,5 \right)^{2}*10} = 668,4\ \left\lbrack \frac{\text{cfu}}{m^{3}} \right\rbrack$$
Liczebność grzybów w 1m3 powietrza:
$$5*10^{4}\frac{0,5}{3,14*5^{2}*10} = 31,8\ \left\lbrack \frac{\text{propagul}}{m^{3}} \right\rbrack$$
b) Odchylenie standardowe:
Liczymy ze wzoru:
$$\delta = \sqrt{\frac{\left( a_{1} - a \right)^{2} + \left( a_{2} - a \right)^{2} + \ldots + \left( a_{n} - a \right)^{2}}{n}}$$
gdzie:
δ- odchylenie standardowe
a1, a2, an- dane liczbowe
ã- średnia arytmetyczna
n- liczba danych liczbowych
Odchylenie standardowe dla liczebności bakterii saprofitycznych:
$$\delta = \sqrt{\frac{\left( 7 - 12,5 \right)^{2} + \left( 18 - 12,5 \right)^{2}}{2}} = 9,66$$
Odchylenie standardowe dla liczebności bakterii pigmentowych:
$$\delta = \sqrt{\frac{\left( 5 - 8,5 \right)^{2} + \left( 12 - 8,5 \right)^{2}}{2}} = 3,5$$
Odchylenie standardowe dla liczebności grzybów:
$$\delta = \sqrt{\frac{\left( 1 - 0,5 \right)^{2} + \left( 0 - 0,5 \right)^{2}}{2} = 0,5}$$
Wyniki analiz:
Na płytce I i II pożywkę stanowił agar odżywczy, natomiast na III i IV Czapek-Doxa.
Wnioski:
Przeprowadzone pomiary w pomieszczeniu sterylnym dowiodły, że jest ono źródłem różnych mikroorganizmów. Badane powietrze atmosferyczne zawierało bakterie (pigmentujące i niepigmentujące) oraz grzyby. Wskaźnik ogólnej liczby bakterii w 1m3 był w ilościach nie zagrażających zdrowiu pracowników. Nie stwierdzono przekroczenia normy 1000 cfu/m3.
Ilość grzybów nie przekroczyła dopuszczalnej normy zanieczyszczenia powietrza, która wynosi 3000 propagul/m3. Badania liczebności mikroorganizmów w powietrzu atmosferycznym prowadzone były w pomieszczeni sterylnym, jednakże znajdujące się tam lampy UV były przez dłuższy czas wyłączone. Promieniowanie ultrafioletowe ma działanie bakteriobójcze, aczkolwiek jego brak spowodował szybki rozwój mikroorganizmów. Słabe nasłonecznienie było również czynnikiem sprzyjającym ich rozwojowi. Temperatura wahała się w granicach 17-19°C, co znacznie wpłynęło na rozwój drobnoustrojów, w szczególności bakterii, których optimum rozwojowe zawiera się w przedziale od 15°C do 25°C.