Biofizyczne i biochemiczne metody badania komórek
Frakcjonowanie - polega na rozdzieleniu zawartości komórki na poszczególne elementy. Wykorzystuje się zjawisko wirowania, dzięki któremu organelle cięższe opadają na dno, natomiast lekkie pozostają na powierzchni. W ten sposób odkryto wiele organelli komórkowych.
Autoradiografia jest to metoda, która służy do:
lokalizacji pierwiastków i związków chemicznych na terenie komórek
lokalizacji zachodzenia reakcji chemicznych na terenie komórek
W metodzie tej stosowane są pierwiastki promieniotwórcze wprowadzane do organizmu.
Chromatografia jest to metoda służąca do rozdzielenia podstawowych składników wchodzących w skład mieszaniny związków.
Rodzaje chromatografii:
Bibułowa
Kolumnowa
Cienkowarstwowa
Chromatografia bibułowa jest stosunkowo prostą metodą stosowaną na przykład w rozdzieleniu barwników chloroplastów. Ekstrakt barwników, uzyskiwany przez roztarcie liści wybranej rośliny z odpowiednim rozpuszczalnikiem stanowi mieszaninę, którą należy rozdzielić. Bibuła chromatograficzna to faza nieruchoma, a mieszanina rozpuszczalników to faza ruchoma. Na bibułę nanosi się przesączony ekstrakt barwników i całość suszy. Do szklanego naczynia (komory chromatograficznej) wlewa się mieszaninę rozpuszczalników. Po wysyceniu wnętrza komory oparami rozpuszczalników umocowuje się w niej pasek bibuły. Mieszanina wsiąka w bibułę i unosi się ku górze, a z nią przemieszczają się barwniki. Szybkość przemieszczania się barwników jest różna. Barwnik najłatwiej rozpuszczalny przesuwa się najszybciej co prowadzi do rozdzielenia wszystkich barwników na pasku bibuły.
Elektroforeza jest to metoda rozdziału substancji chemicznych oparta na ładunkach elektrycznych. Substancje chemiczne różnie naładowane w różny sposób poruszają się w polu elektrycznym.
Pojęcia:
Fibroblast - komórki twórcze tkanki łącznej właściwej, które wyizolowane mają zdolność do namnażania się.
Hodowla pierwotna - hodowla założona bezpośrednio z tkanek pobranych z organizmu
Barwienie komórek
Struktura, składnik komórkowy |
Barwnik |
Efekt barwny |
Ściana komórkowa, celuloza |
Karmin ałunowy |
Czerwony |
Ściana komórkowa zdrewniała |
Zieleń jodowa |
Zielony |
Jądro komórkowe |
Czerwień jądrowa |
Jasnoczerwony |
Ziarna skrobi |
Płyn Lugola |
Fioletowo-niebieski |
Krople tłuszczu |
Sudan III i IV |
Czerwony |