Biofizyczne i biochemiczne metody badania komórek

1. Frakcjonowanie - polega na rozdzieleniu zawartości komórki na poszczególne elementy. Wykorzystuje się zjawisko wirowania, dzięki któremu organelle cięższe opadają na dno, natomiast lekkie pozostają na powierzchni. W ten sposób odkryto wiele organelli komórkowych.

2. Autoradiografia jest to metoda, która służy do:

• lokalizacji pierwiastków i związków chemicznych na terenie komórek

• lokalizacji zachodzenia reakcji chemicznych na terenie komórek

W metodzie tej stosowane są pierwiastki promieniotwórcze wprowadzane do organizmu.

3. Chromatografia jest to metoda służąca do rozdzielenia podstawowych składników wchodzących w skład mieszaniny związków.

Rodzaje chromatografii:

• Bibułowa

• Kolumnowa

• Cienkowarstwowa

Chromatografia bibułowa jest stosunkowo prostą metodą stosowaną na przykład w rozdzieleniu barwników chloroplastów. Ekstrakt barwników, uzyskiwany przez roztarcie liści wybranej rośliny z odpowiednim rozpuszczalnikiem stanowi mieszaninę, którą należy rozdzielić. Bibuła chromatograficzna to faza nieruchoma, a mieszanina rozpuszczalników to faza ruchoma. Na bibułę nanosi się przesączony ekstrakt barwników i całość suszy. Do szklanego naczynia (komory chromatograficznej) wlewa się mieszaninę rozpuszczalników. Po wysyceniu wnętrza komory oparami rozpuszczalników umocowuje się w niej pasek bibuły. Mieszanina wsiąka w bibułę i unosi się ku górze, a z nią przemieszczają się barwniki. Szybkość przemieszczania się barwników jest różna. Barwnik najłatwiej rozpuszczalny przesuwa się najszybciej co prowadzi do rozdzielenia wszystkich barwników na pasku bibuły.

4. Elektroforeza jest to metoda rozdziału substancji chemicznych oparta na ładunkach elektrycznych. Substancje chemiczne różnie naładowane w różny sposób poruszają się w polu elektrycznym.

5. Pojęcia:

• Fibroblast - komórki twórcze tkanki łącznej właściwej, które wyizolowane mają zdolność do namnażania się.

• Hodowla pierwotna - hodowla założona bezpośrednio z tkanek pobranych z organizmu

6. Barwienie komórek

Struktura, składnik komórkowy	Barwnik	Efekt barwny
Ściana komórkowa, celuloza	Karmin ałunowy	Czerwony
Ściana komórkowa zdrewniała	Zieleń jodowa	Zielony
Jądro komórkowe	Czerwień jądrowa	Jasnoczerwony
Ziarna skrobi	Płyn Lugola	Fioletowo-niebieski
Krople tłuszczu	Sudan III i IV	Czerwony

---