Adrian Borowy 4a technikum

Analiza białka jaja kurzego oraz mleka metodami reakcji Biuretowej, Ksantoproteinowej, Cystynowej w celu sprawdzenia zawartości białka w tych produktach

2 Założenia
materiał do badań : próbka białka jaja kurzego oraz próbka mleka

Rodzaj i cel badania: analiza białek w próbkach metodą reakcji biuretowej, ksantoproteinowej oraz Cystynowej w celu określenia zawartości białka.

Informacje o załącznikach

- przepis analityczny

- karty charakterystyk substancji niebezpiecznych

- Pracownia chemiczna - Analizy techniczna

3. Opis metody i wykaz warunków

a) reakcja biuretowa

Jest to reakcja wskazująca na obecność co najmniej 2 wiązań peptydowych bezpośrednio obok siebie bądź w nie dalekiej odległości maksymalnie 1 atomu węgla w związku organicznym.

b) reakcja Ksantoproteinowa

Reakcja białek zawierających aminokwasy z pierścieniem aromatycznym ze stężonym kwasem azotowym (V). W wyniku „nitrowania” wprowadzania grupy -NO2 do pierścienia aromatycznego całość przebarwia się na kolor ( ksanthós ) - żółto.

c) Reakcja Cystynowa

Aminokwasy siarkowe z grupami -SH lub -S-S- (zarówno w stanie wolnym lub

związanym w białkach), podczas ogrzewania w środowisku silnie alkalicznym,

przekształcając się w kwas pirogronowy, uwalniają siarkę w postaci jonów

siarczkowych. Jony siarczkowe reagują z jonami ołowiu (II), dając czarny osad

PbS

Wykaz warunków
odczynniki stosowane do oznaczenia muszą być czyste do analizy

Szkło stosowane w oznaczeniu musi być czyste

Podczas doświadczeń wymagany jest strój ochronny (fartuch, rękawiczki i okulary)

Wycia musi być sprawny

Pobieranie odczynników stężonych tylko pod wyciągiem

Woda stosowana do oznaczenia musi być destylowana

4. Wykaz prac

Organizacja stanowiska pracy

Zgromadzenie sprzętu i odczynników

Umycie szkła

Przygotowanie zestawu do oznaczenia

Przygotowanie próbek

Wykonanie oznaczenia

Zapisanie obserwacji

Postępowanie z odpadami

Postępowanie z niewykorzystanymi odczynnikami

Uporządkowanie stanowiska pracy

Sporządzenie protokołu badań

5. Wykaz sprzętu odczynników i środków ochrony osobistej

Sprzęt

6 probówek

Statyw na probówki

4 wkraplacze

Mikro pipeta na 1cm3

Palnik
trójnóg

Siatka grzewcza

Zlewka pomocnicza na 400 cm3

Bagietka

Pojemnik na odpady organiczne

Odczynniki

Roztwór NaOH ( 1mol/dm3)

Roztwór CuSO4 ( 0,1 %)

Kwas azotowy (V) stężony

Roztwór NaOH ( 20%)

Stężony roztwór Pb(CH3COO)2

Woda destylowana

Środki ochrony osobistej

Rękawiczki ochronne

Okulary ochronne

Fartuch ochronny

6. Opis przebiegu etapów badań

Organizacja stanowiska pracy

Na stanowisku gromadzę zestaw do analizy jakościowej (probówki i statyw na probówki) oraz odczynniki potrzebne do wykonania poszczególnych oznaczeń ( roztwory wodorotlenku sodu, stężony kwas azotowy (V) itp.)

Szkło stosowane w oznaczeniu dokładnie myje dokładnie detergentem i opłukuje wodą destylowaną

W statywie na probówki umieszczam 6 probówek, następnie każda opisuje odpowiednio numerami od 1 do 6.

Przygotowanie próbek

Do probówek NR 1, 3 i 5 wprowadzam po 2 cm3 analizowanego białka jaja kurzego, zaś do probówek nr 2,4 i 6 odmierzam po 2 cm3 analizowanego mleka.

Wykonanie oznaczenia

1. Do probówek 1 i 2 wkraplam po 2 cm3 roztworu NaOH 1mol/dm3. Próbkę ogrzewam na łaźni wodnej a następnie powoli pościałce dodaje 1cm3 0,1% roztworu CuSO4, a następnie obserwować zmianę zabarwienia

Probówka 1 - po dodaniu siarczanu (VI) miedzi (II) zawartość probówki zabarwiło się na kolor brunatny

Probówka 2 - po ogrzaniu próbki zawartość probówki była żółta po dodaniu siarczanu (VI) miedzi (II) zawartość probówki zmieniła barwę na brunatną

Oba białka posiadaj co najmniej 2 wiązania peptydowe.

2. Do probówek 3 i 4 od pipetować po 1 cm3 stęż kwasu azotowego (V) a następnie próbkę próbki ogrzać na łaźni wodnej

Po ogrzaniu pojawia się żółty osad . Po ochłodzeniu dodać po 1 cm3 20% roztworu NaOH i obserwować zmianę zabarwienia w probówkach

Probówka 4 - po dodaniu roztworu NaOH zawartość probówki z żółtego koloru pogłębiła się do pomarańczowego.

Probówka 5 - po dodaniu roztworu NaOH zawartość probówki z żółtego koloru pogłębiła się do pomarańczowego.

3. Do probówek 5 i 6 odmierzyć po 2 cm3 roztworu NaOH 20% i po wymieszaniu dodać 3-5 kropli stęż roztworu octanu ołowiu. Następnie mieszaniny ogrzewać do wrzenia i obserwować zmiany zachodzące w probówkach

W probówce 5 i 6 zaszła identyczna zmiana zabarwienia z początkowego białego zabarwienia po dłuższym ogrzewaniu zawartość zaczęła czernieć, co świadczy o obecności siarki w próbkach

Postępowanie z odpadami

Mieszaniny po reakcyjne należy przenieść do pojemnika przeznaczonego na odpady organiczne

Postępowanie z niewykorzystanymi odczynnikami

Niewykorzystane odczynniki pozostawić w szafce do innych oznaczeń

Nie wykorzystaną próbkę wylać do pojemnika przeznaczonego na odpady organiczne

Uporządkowanie stanowiska pracy

Szkło stosowane w oznaczeniu należy Dobrcz umyć detergentem i odstawić na odpowiednie miejsce.
Wkraplacze przepłukać wodą destylowaną.

Sporządzenie protokołu badań

7. Protokół Badań

materiał do badań : próbka białka jaja kurzego oraz próbka mleka

Rodzaj i cel badania: analiza białek w próbkach metodą reakcji biuretowej, ksantoproteinowej oraz Cystynowej w celu określenia zawartości białka.

Zestawienie wyników

Probówka 1 - po dodaniu siarczanu (VI) miedzi (II) zawartość probówki zabarwiło się na kolor brunatny

Probówka 2 - po ogrzaniu próbki zawartość probówki była żółta po dodaniu siarczanu (VI) miedzi (II) zawartość probówki zmieniła barwę na brunatną

Probówka 4 - po dodaniu roztworu NaOH zawartość probówki z żółtego koloru pogłębiła się do pomarańczowego.

Probówka 5 - po dodaniu roztworu NaOH zawartość probówki z żółtego koloru pogłębiła się do pomarańczowego.

W probówce 5 i 6 zaszła identyczna zmiana zabarwienia z początkowego białego zabarwienia po dłuższym ogrzewaniu zawartość zaczęła czernieć, co świadczy o obecności siarki w próbkach

Wnioski

↓ Reakcje / próbki →	Białko jaja kurzego	mleko
reakcja biuretowa	Zaszła reakcja	Zaszła reakcja
reakcja Ksantoproteinowa	Zaszła reakcja	Zaszła reakcja
Reakcja Cystynowa	Zaszła reakcja	Zaszła reakcja

---