1)Metoda tradycyjna diagnostyki patogenów grzybowych polega na: Morfologiczna ”wizualna” analiza objawów chorobowych oraz cech morfologicznych kultur pod mikroskopem optycznym 2)Wymień char. cechy morf. grzybów na podstawie których przeprowadza sie identyfikacje mikroskopowa: Zarodniki, grzybnia, strzepka, fialidia, chlamydospora, sporodochium, pinnota, kolor grzyba, piknidia, acerwulusy, przycistki, skleroty. 3)Podaj przykłady gatunków grzybów patogenicznych omawianych na cwiczeniach: Fusarium Poa, F.avenaceum, F.culmorum, F. graminearum, F. sporotrichioides
4) Wymień pożywki:-organiczne: PDA- glukoza, agrar, ziemniaki:uniwersalna, pożywka żytnia -półsyntetyczne, czapka z ekstraktem drożdży -syntetyczne: -SNA *czapka*syntetyczna kwa śna 5) Jakiego typu zarodnikowanie jest u Phoma i Ascochyty Ascochyty - piknidia kuliste jajkowate twory ciemno zabarwione z ujściem ściana piknidium złożona jest z kilku warstw. 6) Co to jest przeciw Ciało a antygen Przeciwciało immunoglobuliny to rozpuszczalne białka syntetyzowane przez org w odpowiedzi na pojawienie się obcych subst kazde przeciwciało ma powinowadztwo do obcego mat który stymuluje jego synteze. Co to jest antygen? obca substancja w organizmie, która wykazuje cechy: immunogenność, czyli zdolność wzbudzenia przeciwko sobie odpowiedzi odpornościowej swoistej oraz antygenowość, mogą to być białka, polisacharydy, nukleiny. 7) Gdzie powstają przeciwciała u organizmów stałocieplnych?
Przeciwciała są wytwarzane przez limfocyty β. 8) Jaką funkcje pełnią przeciwciała u organizmów stałocieplnych - Rozpoznają swój antygen z wysoką swoistością wiążą go i unieszkodliwiają IgG- najważ. Immunoglobulina w org. , decyduje o układzie odpornościowym. IgM- wczesne przeciwciała, pierwsz linia obrony przeciw obcym drobnoustrojom w org., układ krazenia IgA- ochrona błon sluzowych. IgD- wpływ na funkcje limfatyczne. IgE- ochrona przeiwko pasozytom jelitowym, odpow. również za różne objawy. 9) Co to jest koniugat? Przeciwciało znakowane enzymem, np. fosfatazą alkaliczną.
10) Długość fali mierz wart optyczną w teście Elisa: 405nm 12) Reakcja testu Elisa warunki, odczynniki: przeciwciało IgG, antygen, koniugat, substrat p.nitrofenylofosfat(powodujący reakcję barwną), bufory: *powlekający do rozcieńcz IgG(węglan sodu);*PBS-T do płukania(pH 7,4); *PBS-T dp próbek i konigatu(albumina, PVP - poliwinylopirolidon);*bufor substratowy ph 9,6(H2O+dwuetanoalamina). 13) nie produkują przeciwciał 14) Co stanowi wzorzec negatywny w teście ELISSA: Sok zdrowej rośliny 15) Przeciwciała lub cząsteczka immunoglobuliny składa się z: -2łańcuchy lekkie,-2łańcuchy ciężkie (ciężki jest dłuższy), łańcuchy połączone są mostkami dwusiarczowymi -zawiasy, -miejsca wiążące antygen Białkowe cząst złożone
Przeciwciała to: Rozpuszczalne białka syntetyzowane przez organizmy w odpowiedzi na pojawienie się obcych substancji. Ma powinowactwo do antygenu.16) Detergent w procesie izolacji DNA, jego rola: mechaniczne uszkodzenia komórek, rozerwanie ściany komórkowej, niszczy części tłuszczowe w błonie komórkowej, detergenty działają degradująco na białka, powodując rozbicie ich dużych struktur i powstawanie mniejszych, materiał genetyczny jest związany z białkami,po zastosowaniu detergentu zostanie on z nich oczyszczony. 17) Sposoby oczyszcz DNA: *poprzez wytrącanie(precypitację) - początkowo zastosowanie mieszaniny chloroformu(usuwanie białek); później nast wytrącanie DNA przy uzyciu alkoholu(izopropanol,etanol), podczas gdy detergent zostaje usuniety z alkoholem. *z zastos membran silikonowych - oczyszczanie kw nukleinowych polega na wiąz DNA na membranach oraz przemywaniu ich alkoholem. DNA ma ładunek ujemny a membrana dodatni, zatrzymuje. Ostatni etap to elucja DNA z kolumny.
18. Trudności związane z izolacją DNA grzybów:- trudno rozerwać ść.kom. grzybów, - jest jej niewiele,- niewielkie rozmiary genomu,- zawierają dużo mniej intronów. 19.Wymień komponenty reakcji PCR: -genomowe DNA (matryca),- bufor reakcyjny,-nukleotydy dATP, dCTP, dGTP, dTTP,-MgCl2,-polimeraza DNA,-primery,-H2O. 20.Co to jest termocykler? Urządzenie do przeprowadzania reakcji PCR,wyposażone w blok grzejny z otworami na probówki w których przeprowadza się reakcję.Urzadzenie zapewnia zmiany temp zgodnie z wcześniej zdefiniowanym programem.. 21.Na czym polega reakcja multiplex PCR? Jest to mieszanina kilku zestawów specyficznych gatunkowo primerów w jednej reakcji. Polega na wykrywaniu kilku gatunków grzybów w jednej reakcji PCR z zastosowaniem kilku primerów. 22. Metody stosowane w analizach zmienności genetycznej populacji grzybów fitopatogenicznych: 1.Metoda genetycznych odcisków palców -polega na izolowaniu i sporządzaniu fragmentów DNA 2.RELP- technika w której organizmy mogą być różnicowane przez analizę wzorów pochodzących z pocięcia ich DNA. 3. PCR-RELP- polimorfizm dł. Fragmentów restrukcyjnych. 4 AFLP.5.RAPD.6.SOR. 23.Wymień zalety metody diagnostycznej PCR: Wysoka czułość, krótki czas analiz, wiarygodność, bezpieczeństwo dla zdrowia i środowiska. 24. Elektroforeza- technika analityczna której istotą jest rozdzielenie mieszaniny związków chem. Na możliwie jednorodne frakcje przez wymuszone wędrówki ich cząsteczek w polu elektr. 25.Mykotoksyny- są to wtórne trujące metabolity grzybów Alternaria, Aspergillus, Penicilium, Fusarium. 26.Toksyny wytwarzane przez rodzaj fusarium: fititoksyny, zootoksyny,wytwarzają zearelon. 27. Wymień czynniki mające wpływ na skażenie produktów roślinnych mykotoksynami: Warunki pogodowe, skład gatunkowy i potencjał toksynotwórczy czynnika chorobotworczego, odmiana rośliny, zmianowanie, ochrona roślin, wilgotność i termin zbioru, warunki przechowywania i produkcji żywności. 28.TGAGCGAC-ACTCGCTG. 29.Wymień biotyczne czynniki wpływ. Na fotosynteze:- rodz. Natężenia światła,- napromieniowanie ultrafioletowe,- temp,- stężenie CO2 i O2,- dostępność wody glebowej i atmosferycznej,- zasolenie,- zakwaszenie,- obecność metali ciężkich. 30.W jakim zakresie mieści się promieniow. PAR: promieniowanie fotosyntetyczne 400-700nm. 31. W jakich jednostkach mierzona jest intensywność fotosyntezy za pomocą przenośnego analizatora gazowego LI-COR6400: um CO2m-2 powierzchni liścia *s-1. 32.Na czym polega efekt Warburga:Jeżeli zawartość tlenu obniży się z 21% do 1% to intens. Fotosyntezy wzrasta do 45 %..33.Optymalna temp dla fotosyntezy u C3:C3=25-280C, C4=32-350C.34.Stężenie CO2 w atmosferze: 0,037 % 227 ppm.35.Jaki pierwszy trwały związek powstaje w wyniku karboksylacji u roślin o fot. C3:PGA fosfoglicerynian -zw. 3 węglowy.36.Wym. pierwotny akceptor CO2 u roślin o fotosyntezie typu C3:RuBp. Rybuloza 1,5 bifosforan.