1

Metabolizm kwasów nukleinowych. Preparatyka i oznaczanie aktywności Rnazy trzustki.

Rybonukleazy (RNazy) (Ryc.l) - enzymy degradujące kwas rybonukleinowy. Rybonuklcazy (RNazy) należą do klasy hydrolaz. podklasy nukleaz - EC 3.1-. Rybonukleazy hydrolizują wiązania fosfodiestrowe w kwasach rybonukleinowych W wyniku tej reakcji powstają pojedyncze nukleotydy i/ lub kilkunukleotydowe łańcuchy RNA. Każdy posiada wolny koniec 3’-OH, oraz wolny koniec 5’-OH.

Rycina 1. Rybonukleaza A z trzustki bydlęcej

Reakcja hydrolizy RNA przebiega w dwóch etapach: W pierwszym etapie reakcji następuje cyklizacja fosforanu związanego z węglem 3*-OH i uwolnienie nukleotydu z wolnym końcem 5*-OH. W drugim etapie reakcji cykliczna pochodna (iniermediat) zostaje zhydrolizowana i powstaje produkt z wolnym końcem 3*-(HPO')-OH (Ryc.2)

I ETAP

2 ETAP

M

O

H

O

N

H

W • N H

* R H

k

H

Rycina 2. Mechanizm reakcji Rnazy