Odczynniki:
• woda destylowana
• 96% etanol
• chloroform
• aceton
• olej roślinny
Wykonanie:
Do poszczególnych probówek zawierających po kilka kropli oleju dodać odpowiednio po 1 ml kolejnych rozpuszczalników. Zapisać wniosek.
9. Wykrywanie cholesterolu (reakcja Liebermanna - Burcharda)
Stężony kwas siarkowy lub mieszanina kwasu siarkowego i bezwodnika kwasu octowego powodują odwodnienie cholesterolu do sulfonowej pochodnej cholestadienu.
W reakcji Salkowąkiego (ze stężonym kwasem siarkowym) powstaje czerwony kwas disulfonowy chlestadienu, a w reakcji Liebermanna - Burcharda ( z kwasem siarkowym i bezwodnikiem octowym) tworzy się zielono zabarwiony monosulfonowy kwas cholestadienu.
Obie reakcje należy przeprowadzać w warunkach bezwodnych.
Odczynniki:
• Stężony kwas siarkowy
• Bezwodnik kwasu octowego
• Roztwór cholesterolu w chloroformie
• Ekstrakt eterowy lub chloroformowy lipidów (wyjściowy ekstrakt odparować do sucha i rozpuścić pozostałość w chloroformie)
Wykonanie
Do suchej probówki dodać 1 ml roztworu cholesterolu lub ekstraktu lipidowego, 10 kropli bezwodnika kwasu octowego i 1 kroplę stężonego kwasu siarkowego. Pojawia się czerwone zabarwienie które stopniowo przechodzi w zielone.
1. W L.Kłyszejko-Stefanowicz (red.) Ćwiczenia-z biochemii PWN Warszawa 1999
2. .Ostrowski, B.Filipowicz (red.) Ćwiczenia z chemii ogólnej i fizjologicznej PZWN
(1980) W-wa
3. L.Stryer Biochemia , PWN Warszawa 2000
4. W.Mejbaum_Katzenellenbogen, I.Mochnacka - Kurs praktyczny z biochemii, PWN Warszawa 1966