h v
Rozcieńczyć wodą destylowaną do 20 cmJ ( czyli dodać po 14 cm3 wody). Wymieszać zatykając probówki korkiem.
Odczytać ekstynkcję wszystkich prób na spekolu przy długości fali 500nm. w ciągu 15- 45 minut po rozcieńczeniu.
Ilość cukrów redukujących, w przeliczeniu na glukozę, odczytać z krzywej wzorcowej. Wyniki przedstawić graficznie:
1. Sporządzić krzywą wysycenia enzymu substratem:
/V/ = ilość glukozy wytworzona w ciągu 15 min. inkubacji /S/ = użyte stężenie sacharozy wyznaczyć Km
2. Przekształcić (zlinearyzować) wykres otrzymany w punkcie 1 wg. Lineweavera - Burka
/ V/ i / S/ wyznaczyć Km
3