CCF20121201005

Nr kat.: 178172148

Świadectwo dopuszczenia do stosowania nr 10953645 wydane przez MZiOS/COTM

mężczyźni

kobiety

dzieci do 1 roku dzieci 2-6 lat dzieci 7-12 lat

około 100 oznaczeń 2 x 250 ml

1.2 x 250 ml (odczynnik Drabkina)

2. 1 x 50 ml (wzorzec hemoglobiny)

Odczynnik Drabkina - nr kat. 178228141 i wzorzec hemoglobiny - nr kat. 178284147 są również sprzedawane oddzielnie.

ZASADA OZNACZANIA

Hemoglobina i jej pochodne znajdujące się we krwi pod wpływem odczynnika Drabkina ulegają przekształceniu w cyjanomethemoglobinę, której gęstość optyczną mierzy się fotometrycznie.    /

MATERIAŁ

Krew kapilarna lub dobrze wymieszana krew werseniano-wa (uzyskuje się ją przez dodanie około 1 ml krwi do 1-2 mg suchego wersenianu disodu).

APARATURA

Spektrofotometr do pomiarów absorbancji w zakresie widzialnym widma z kuwetami grubości warstwy mierzonej d=1 cm.

ODCZYNNIKI

1.    Odczynnik Drabkina:

—    0,048 g/l KCN,

—    0,18 g/l K₃[Fe(CN)₆],

—    0,136 g/l KH2PO4,

—    0,1 g/l detergent

2.    Wzorzec hemoglobiny-

roztwór o stężeniu ok. 16 g/dl (ok. 10 mmol/l) hemoglobiny. Oznaczona wartość stężenia hemoglobiny (c_w) podana jest na etykiecie wzorca.

Odczynniki przechowywane w temp. 4-8 °C są przejrzyste i trwałe 6 miesięcy od daty produkcji (nr serii) podanej na opakowaniu.

ROZTWORY ROBOCZE

1.    Odczynnik Drabkina - roztwór gotowy do użycia.

2.    Wzorzec hemoglobiny - roztwór gotowy do użycia.

OZNACZENIE

Do 5 ml odczynnika Drabkina dodać 0,02 ml (rozcieńczenie 1 : 251) krwi kapilarnej lub dobrze wymieszanej krwi wersenianowej.

Wymieszać i inkubować w temperaturze pokojowej 5 min. Zmierzyć absorbancję (Ab) roztworu przy X=540 nm w kuwecie d=1 cm względem odczynnika Drabkina. Następnie zmierzyć przy tej samej długości fali absorbancję wzorca (A_w) względem wody.

ZESTAW DIAGNOSTYCZNY DO OZNACZANIA STĘŻENIA HEMOGLOBINY METODĄ CYJANOMETHEMOGLOBINOWĄ

Stężenie hemoglobiny wyliczyć według wzoru:

^{Hb (g/dl) =} ^ ^{x cw} Ab

Hb (mmol/l) = — x cwi Aw

gdzie:

Ab - absoriąąncja próby badanej Aw - absorbancja wzorca cw - stężenie wzorca w g/dl cwi - stężenie wzorca w mmol/l

Przy użyciu spektrofotometru wysokiej klasy można pominąć pomiar absorbancji wzorca, a zawartość hemoglobiny obliczyć na podstawie odczytanej absorbancji badanej próby stosując następujące przeliczniki: Hb(g/dl) = A_B x 36,8 Hb(mmol/l) = Ag x 22,8

WARTOŚCI PRAWIDŁOWE

16.0- 18,0 g/dl

12.0- 16,0 g/dl

11.0- 14,0 g/dl 10,9-14,2 g/dl

12.0- 15,5 g/dl

Hb (mmol/l) = 0,62 • Hb (g/dl)

UWAGI

1.    Zakres prostoliniowości: 11-19 g/dl

2.    Zmiana absorbancji o 0,001 odpowiada stężeniu hemogloginy 0,02 g/dl.

3.    Pojawiające się w niektórych pomiarach zmętnienie, fałszywie zwiększające stężenie hemoglobiny, na ogół wywołane jest wypadaniem białka, najczęściej makroglobulin. Pomiar absorbancji przeprowadza się wtedy po usunięciu zmiętnienia przez intensywne wirowanie (np. 2000 g 20 min.) lub po dodaniu 1 kropli roztworu NH4OH (1mol/l). Zmętnienie .wywołane znaczną hiperlipidemią nie ustępuje

ani pod wpływem wirowania, ani po dodaniu NH4OH.

LITERATURA

1.    J. Krawczyński, T.Osiński, Laboratoryjne metody diagnostyczne, PZWL W-wa 1967

2.    H. Bomski, Podstawowe laboratoryjne badania hematologiczne, PZWL W-wa 1989

3.    Merck, Klinisches Labor, 1974

Przedsiębiorstwo Przemysłowo-Handlowe „POLSKIE ODCZYNNIKI CHEMICZNE ”

Spółka Akcyjna

44-101 Gliwice, ul. Sowińskiego 11 tel. 31-20-81, telex: 316393, fax 312680