022

° °A\	0		o -Ą
r nh2 + R1AG'^Ny	—► Akl-^R R’ H	+	N-OH H
0			o
Aminę NHS Ester	Amidę Bond	NHS Leaving
Compound Derivative			uroup

Bezwodnik kwasu octowego

Acetylacja grupy aminowej w białku jest relatywnie specyficzna jeżeli jest prowadzona w nasyconym roztworze octanu sodu. W nadmiarze jonów octanowych pochodne O-acetylotyrozyny są niestabilne. Pochodne tyrozyny gwałtownie hydrolizują w zasadowym pH, nawet przy braku jonów octanowych.

Dodanie hydroksyloaminy także powoduje rozpad pochodnych O-acetylotyrozyny.

Blokowanie grup sulfhydrylowych

Są dwa typy związków blokujących: odwracalne i nieodwracalne. Nieodwracalne prowadzą do wytworzenia wiązania tioeterowego. Odwracalne blokują poprzez wytworzenie wiązania S-S i mogą być usunięte odpowiednim związkiem redukującym.

N-etvlomaleimid

Związek alkilujący reagujący z grupami SH - powstaje stabilne wiązanie tioeterowe.

Reaguje specyficznie z grupami SH w pH 6.5-7.5

o    o

Suifhyefryf    ^ateiirside    Thioettar

C&mpoigKl    Deriv3śv&    Bond

Pochodne iodooctanowe

Jodoacetamid- wykazuje najwyższą reaktywność względem grup SH. Przy właściwie dobranym stosunku jodoacetamidu względem grup SH i w lekko zasadowym pH, zachodzi wyłącznie modyfikacja cystein.

Odczynnik Ellmana

Związek odwracalnie blokujący grupy SH.