ośrodkowego układu nerwowego [11-12]
Oętna »/a<ę»v0,ści inhihi.-ybadanych r..yf«or,W
Aktywność inhibicyjną ot
rostanic określona metodą2 mpam meli*y w stosunku do AChE
opisaną przez ki Imana [8] Analizowany£^6?*, ZyS‘Ujączmodyfikowaną metodvke buforu fosforanowego. 50 pi barwnika DTNB (OOttnoTd^A pH - %
(ATChl). 10 „I AChE on* 50 ’£*£“
przygotowane seisle wg instrukcji prowadzącego. ' 1 ‘toaWorj.
Napar przygotować zalewając 1 g badanego materiału 100 cm5 wods iWC\ upływie 15 minut napar przesączyć przez średni sączek i ochłodzić do tempeia^. pokojowej. Następnie sporządzić 3 różne stężenia (zadane przez prowadzącego ćwiczenia* badanego naparu.
Roztwór z badaną substancją termostatow ać w kuwecie przez 10 minut w temperaturze
}~*±0.2 C. Hydroliza acetylotiocholiny wywoła zmianę barwy, którą należy śledzić ilościowo, mierząc absorbancję przy długości fali 412 nm przez 1 min. Substancją odniesienia es: roztwór bez materiału badanego, ale z ilościowym dodatkiem 0,1 mol-dnr roztworu kilbru fosforanowego o pH = 8.0. Stężenia roztworów zbadać w trzech seriach pomiarów, a następnie wyznaczyć dla nich % inhibicji:
% inhibicji = [(Ao - Asr)*100%]/Ao gdzie:- absorbancja roztworu odniesienia:
At,- średnia wartość absorbancji roztworu z badanym naparem