CCF20090529000

Ćwiczenie nr 17

Oznaczanie zawartości azotu ogólnego metodą Kjeldahla i Kofranyi

Oznaczanie zawartości azotu ogólnego metodą Kjeldahla

Mineralizacja

Wielkość próbki przeznaczonej do mineralizacji zależy od zawartości azotu.

Próbki pochodzenia roślinnego zawierające niewielkie ilości białka odważa się w ilościach 1,5 do 2,0 g. Próbki pochodzenia zwierzęcego w ilościach 0,5 do 0.7g. jednakże próbki zawierające znaczne ilości \yody np. mleko, odważane są w ilościach 1_0_ do_20 g. Próbki stale muszą być rozdrobnione

Do umieszczonej w kolbie Kjeldahla (wcześniej rozdrobnionej w moździerzu i zważonej na wadze z dokładnością 0,001 g) naważki próbki dodać 2 g mieszaniny selenowej , następnie przy ciągłym mieszaniu dodać 5 cm³ 30 % roztworu nadtlenku wodoru.

Po dokładnym wymieszaniu ostrożnie, małymi porcjami dodać 10 cm^J stężonego kwasu siarkowego. Po dodaniu każdej porcji zawartość kolbki należy dokładnie wymieszać. Podczas dodawania kwasu siarkowego kolba z zawartością silnie się rozgrzewa. Należy mieć w pobliżu dostatecznie dużą zlewkę, aby można było do niej wstawić rozgrzaną kolbę. Podczas dodawania kwasu kolbę należy trzymać ukośnie, aby dodawany kwas spływał po ściance. Podczas mieszania wylot kolby należy kierować w stronę ściany. Zdarza się, że po dodaniu nieco większej ilości kwasu lub niedokładnym wymieszaniu temperatura mieszaniny gwałtownie wyrasta i zawartość kolby zostaje wyrzucona na zewnątrz. Po dodaniu całej ilości kwasu siarkowego kolbę Kjeldahla mocuje się ukośnie w łapie na statywie opierając dolnąjej część na trójkącie kaolinowym położonym na przymocowanym do statywu pierścieniu. Wylot kolby należy skierować w stronę ściany. Po sprawdzeniu, że kolba jest dobrze zamocowana należy rozpocząć ogrzewanie. Kolbę ogrzewa się bezpośrednio płomieniem palnika gazowego, trzymając palnik w ręce i poruszając nim w ten sposób, aby płomień palnika gazowego przesuwał się tylko po tej części kolby, w której znajduje się ciecz.

Początkowo podczas ogrzewania, wydzielają się duże ilości substancji gazowych

—    4r

powodując pienienie się cieczy. Gdy warstwa piany zacznie się szybko powiększać, należy odsunąć palnik, poczekać, aż piana opadnie i dalej ogrzewać. Po 15 minutach ogrzewania pozostawić kolbę, do ostygnięcia i do zimnej zawartości dodać mieszając 5 cm³ 30 %