DSC00218(1)

Korzystając z uzysKanycn wyniKow przygotuj na papierze milimetrowym wykres zależności absorbancji (oś Y) od stężenia kwasu askorbinowego (oś X) oraz oblicz współczynnik kalibracji K.

b) Oznaczanie stężenia witaminy C w materiale biologicznym Do probówek wirówkowych zawierających po 1 mL surowicy krwi lub soku z cytryny, ziemniaka i in. dodaj po 2 mL 10% roztworu TCA (kwas trójchlorooctowy), próby energicznie wymieszaj i wstaw na 5 minut do pojemnika z lodem. Wytrącony osad odwiruj (3000 obrotów / min. przez 10 min.).

Do dalszych oznaczeń pobierz do probówek po 0,5 mL supematantu. Do każdej probówki dodaj najpierw po 1,5 mL wody destylowanej, a następnie po 0,2 mL odczynnika Folina. Wykonaj próbę ślepą zawierającą 0,5 mL 10% roztworu TCA, 1,5 mL wody destylowanej i 0,2 mL odczynnika Folina. Wszystkie próby energicznie wymieszaj. Po 10 minutach zmierz absorbancję prób badanych wobec próby ślepej na spektrofotometrze przy długości fali A = 700 nm.

Korzystając z wyliczonego współczynnika kalibracji oblicz stężenie witaminy C w badanym materiale biologicznym (uwzględnij rozcieńczenie próby podczas odbiałczania -12 razy).

Ćwiczenie 2: Wykrywanie obecności witamin rozpuszczalnych w tłuszczach a) Wykrywanie witaminy A

Do 1 mL roztworu witaminy A dodaj 1 kroplę stężonego H₂S0₄ i energicznie wymieszaj. Powstaje intensywny niebieski kolor, który po czasie przechodzi w zabarwienie fioletowe i czerwone.