Obrazek 0001(4)

50

ĆWICZENIA

ĆWICZENIE 13

TEMAT: MORFOLOGIA KOMÓRKI BAKTERYJNEJ

Cel: Określanie kształtu i wielkości komórek oraz

charakterystycznych form skupisk. Preparaty barwione metodą Lóefflera - m. prosta pozytywowa

CHARAKTERYSTYCZNE KSZTAŁTY KOMÓREK I FORMY SKUPISK BAKTERII

ZIARNIAKI

ZIARNIAK

V*

CGCCUS

DWOINKA

nipiococcus

TETRADA

(czwóniak)

8»

TETRHCOCCUS

PAKILTOWItG

SRRCIHH

GRONKOiyiŁC

STHPIfAOGOCCUS

PHCIORKOWIEG

STREPTOGOCCUS

FORMY CYLINDRYCZNE

kokooałeczka pałeczka - bacterium laseczka-bacillus forma nitkowata

WSKAZÓWKA

W bakteriologii używa się także terminu laseczka - bacillus. Termin ten odnosi się do form pałeczkowatych posiadających zdolność wytwarzania endospor - przetrwalników.

Metoda barwienia błękitem metylenowym -Lóefflera ma zastosowanie przy ustalaniu liczby drobnoustrojów w mleku oraz przy ustalaniu liczby żywych komórek drożdży w kulturach używanych w przemyśle fermentacyjnym. Żywe komórki drożdży nie barwią się błękitem, zaś komórki martwe są w preparacie wybarwione na kolor niebieski.

i;

ii

jjMateriały:

ij

;j 1,    24 h hodowle szczepów o znanej przynależności systematycznej

2. Płytki z posianym do pojedynczych kolonii materiałem z dowolnie wybranych źródeł ^:!    3.    Szkiełka przedmiotowe

ij    4.    Probówka z jałowym płynem fizjologicznym

;i 5. Zestaw do bawienia: mydełko, szmatka bawełniana, wanienka, tryskawka z wodą ;j    destylowaną, szczypce Corneta

ij    6.    Błękit metylenowy Lóefflera

Wykonanie:

|    1. Odtłuścić szkiełko przedmiotowe przy pomocy mydełka i lnianej szmatki

2.    Przygotować cienki rozmaz badanego materiału. W zależności od tego, czy materiałem wyjściowym jest 24 h hodowla na podłożu płynnym (patrz: Materiały

l    - punkt 1) czy pojedyncza kolonia (patrz: Materiały- punkt 2) należy, odpowiednio:

3.    Przenieść jałową ezą 1 -2 oczka na powierzchnię szkiełka przedmiotowego; i rozprowadzić po powierzchni w formie cienkiego rozmazu

4.    Nanieść kroplę płynu fizjologicznego z probówki i rozprowadzić w niej materiał:

ii    pobrany ezą, z zachowaniem warunków jaiowośct,    z    brzegu typowej, pojedynczej ;

;; ’    kolonii    :

!j    5.    Wysuszyć rozmaz w powietrzu

ij 6.    Utwalić suchy preparat w płomieniu palnika

l 7. Nawarstwić preparat błękitem metylenowym na 5 min

j{ 8. Spłukać preparat wodą; wysuszyć odciskając nadmiar wilgoci z preparatu przy; jl    pomocy bibuły filtracyjnej.    ;

9. Nawarstwić preparat olejkiem immersyjnym; oglądać pod mikroskopem posługując; ij    się obiektywem immersyjnym (100x)

ij    10.    Wyniki obsewacji mikroskopowych zamieścić    w    tabeli17    ;