Laboratorium 15 SOKI TRAWIENNE
I. Wykrywanie enzymatycznych składników soków trawiennych.
Ćwiczenie 1. Wykrywanie aktywności amylazy trzustkowei,
Do 1 mL 1% roztworu skrobi dodaj 2 krople 0,2% J w roztworze KJ, 3-4 krople 1% roztworu NaCI oraz 1 mL roztworu pankreatyny. Probówkę wstaw do termostatu o temp. 40°C na 10 min. Obserwuj zmianę zabarwienia zawartości probówki. Sformułuj wnioski.
*
Ćwiczenie 2. Wykrywanie aktywności trypsyny.
Przygotuj 4 probówki zgodnie z poniższą tabelą:
etap |
odczynniki |
probówka 1 |
probówka 2 |
probówka 3 |
probówka 4 |
1. |
roztwór pankreatyny |
2 mL |
2 mL |
2 mL |
- |
2. |
probówkę 2 wstaw na 10 min. do wrzącej łaźni wodnej, a potem ostudź | ||||
3. |
0,2% roztwór Na2C03 |
1 mL |
1 mL |
- |
2 mL |
4. |
0.2% roztwór HCI |
- |
- |
1 mL | |
5. |
do wszystkich probówek włóż po małym kawałku kliszy rentgenowskiej | ||||
6. |
wszystkie probówki wstaw do termostatu o temp 40°Ć na 30 minut |
Zaobserwuj, w których probówkach żelatyna pokrywająca kliszę uległa rozkładowi Sformułuj wnioski
Ćwiczenie 3. Wykrywanie aktywności lipazy.
Do probówki wiej 3 mL mleka, 0,5 mL roztworu pankreatyny oraz 1 kroplę fenoloftaleiny Następnie dodaj około 5-6 kropel 5% roztworu Na20O3 (mieszając zav/artość probówki) do uzyskania trwałego jasnoróżowego zabarwienia całej objętości mleka. Probówkę wstaw do termostatu o temp 40 C na 5-10 minut. Obserwuj zmianę barwy zawartości probówki. Sformułuj wnioski.
odczynniki
probówka 1 1 mL
probówka 2 1 mL
żółć rozcieńczona 100 raz’
5 mL
5 mL
Ćwiczenie 4. Oznaczanie aktywności lipazy trzustkowej. Przygotuj 2 probówki zgodnie z poniższą tabeia^.
etap
oliwa
2.
5 mL
5 mL
3.
5.
TUSIUI dl mwy i--«--•'
energicznie wytrząsaj zawartość obu probówek o^zez z m .nu.y
0,05 M bufor fosforanowy pH 7,0
świeży sok trzustko w woda destylowana
2 mL
2 mL
dokładnie wymieszaj zawartość obu probówek
obie probówki inkubuj w termostacie o temp. 40'C Przez 20 J minut, mieszając ich zawartość co-i
8.
Po zakończeniu inkubacji zawartość probówek przelej do 2 koIb ek Eycr ^ ^ po 5 mL
przeniesień,a zawartość, probówek, przepłucz probowk., wiewając do Kaź..] wody destylowanej - popłuczyny zlewaj do odpowiedmcn kolbwK