spektra fotometryczną kuwetę pomiarową />.=440 I 570 nm/. Wartości pomiarów z detektora rejestrowane są przez komputer, kreślący krzywe elucyjne. Program komputerowy oprócz sterowania warunkami rozdziałów, zapewnia również integrację uzyskanych danych.
Cel ćwiczenia: określenie ilościowego składu aminokwasowego hydrolizatu albuminy wołowej.
Wykonanie:
1. Przeprowadzić analizę próbki hydrolizatu, wykorzystując program analizatora o
następujących parametrach:
Czas [min] |
Bufor |
Temp. kolumny |
Eluowane aminokwasy |
0,00 |
Bi/or cytrynianowo-jodowy pH 2,65 [1J |
60 |
Asp, Glu, Thr, Ser |
7,00 |
Bufor cytrynlanowo-sodowy pH 3,0 [2] |
60 |
Pro, Gfy, Ma, Cy$, Val |
33.00 |
8ufor cytryntonowo-scdowy pH 4,25 [3] |
60 |
Met, Ile, Leo |
46,00 |
Bufor cytrynianowo-sodowy pH 7,9 (4) |
60/74 |
Tyr, Phc, His, Lys, NH), Arg |
70,00 |
0,2 M NaOH |
74 |
Regeneracja *łoia |
80,CO |
Bufor cytrynianowo-iodowy pH 2,6 [1] |
74 |
Równoważenie kolumny |
Opracowanie wyników I dyskusja:
1. Opierając się na dostarczonym chromatografie standardu hydrolizatu białkowego zidentyfikować aminokwasy obecne w badanej próbce.
2. Wyznaczyć Ilościowy skład aminokwasowy badanego hydrolizatu /% wagowy/
3. Opierając się na uzyskanych wynikach określić dokładność stosowanej metod-/ Ilościowego oznaczanie aminokwasów przez porównanie z danymi literaturowymi.