img048

| ZESTAW DIAGNOSTYCZNY DO ENZYMATYCZNEGO OZNACZANIA ZAWARTOŚCI GLUKOZY WE KRWI, W SUROWICY, PŁYNIE MÓZGOWO-RDZENIOWYM, MOCZU METODĄ TRINDERA

200 oznaczeń

1 x 200 ml

1 A. 1 x 200 ml 1B. 1 x fiofiiizat 2.    1 x 15 ml

300 oznaczeń

3 x100 ml

1 A. 3 x 100 ml IB. 3 x liofilizat 2.    1 x 15 ml

500 oznaczeń

2 x 250 ml

1 A. 2x250 ml 1B. 2 x liofilizat 2.    1 x 15 ml

ZASADA OZNACZANIA

Glukoza pod wpływem oksydazy glukozowej {GOD) utlenia się do kwasu glukcnoweoo z wytworzeniem nadtlenku wodoru, który w obecności peroksytiazy (POD) utlenia chromogen i całość przyjmuje czerwone zabarwienie. Natężenie powstałego zabarwienia jest proporcjonalne do stężenia glukozy w badanej próbce. Metoda nie wymaga odbiałczania.

MATERIAŁ

Krew', surowica, płyn mózgowo-rdzeniowy, mocz.

b) krew

Przygotowanie materiału badanego.

Do odpowiednich probówek wirówkowych wprowadzić po I 0,05 mi wzorca i materiału badanego, następnie do każdej oo-J dać 0,5ml 5% kwasu trichlorocctowago. Wymieszać i wirować i przez 15 min. przy 4000 obr./min. Oddzielić supernatant. Postępować zgodnie z tabelą.

	Próba j Próba zerowa { wzorcowa	j Próba
Roztwór roboczy (1.)	1.5 ml j 1.5 mi	1.5 rnl
Wzorzec 2.	}	-
Materiał badany	• i 1	0.1 mi
Woda destylowana	0.1 ml |	-

APARATURA

Spektrometr do pomiarów absorbancji w zakresie widzialnym widma z kuwetami o grubości warstwy mierzonej d=1 cm: •

ODCZYNNIKI

1 A. Bufor (fosforany, hydroksybenzoesan), pH 7,0.

13. Enzymy (GOD min. 5 U/ml; POD min. 2 U/ml; 4-aminoantypiryna 0.2S mmci/i).

2. Wzorzec (stabilizowany roztwór glukozy) 90 mg/dl.

Zestaw przechowywany w temp. 4-8^cC jest trwały 12 m-cy od caty produkcji (nr serii) podanej na opakowaniu.

_; ?

ROZTWORY ROBOCZE

(1.) Roztwór roboczy sporządzić rozpuszczając jedną fiolkę enzymów 13. w jednej butelce bufetu 1 A.

Tek przygotowany roztwór prrechiwy-.-. a.-.y ;v oryginalnej butelce w temperaturze 4 * e'C jest trway r:. ei.łąc.

OZNACZENIE

a) surowica, płyn mózgowo-rdzeniowy, mocz

Dokładnie wymieszać, inkubcwać 15 min. w temp. pokojowej. Odczytać absorbancję prób wzorcowych i badanych wobec próby zerowej przy a=500 nm w czasie nieprzekraczającym 30 min.

OBLICZENIA

Stężenie glukozy (c) w badanej próbce obliczyć wg wzoru:

C _ ^A?^r-'-y riSglSL _x 50 rr.ęyj,

Apróby wzorcowej

WARTOŚCI PRAWIDŁOWE

mg/dl    mmoLi

We krwi:    60-100    3,36—5,60

W surowicy."    70—110    3,92—5,16

W płynie mózgowo-rdzeniowym:    45- 70    2.52-3,62

UWAGI

1.    Zestaw 'cięży przechowywać tv ciemnym i suchym miejscu ;v temperaturze A + S C.

2.    Proporcjonalne zmniejszenie lub zwiększenie objętości wszystkich odczynników nie wptywa r.a wynik oznaczenia.

3.    W c elu przeliczenie' zawartości glukozy z mg/dl na mrncbl stosować przelicznik mg/dl x 0,055 mrr.clA.

A Jeżeli sbsorbancja przekracza 1,6 próbę badaną rozcieńczyć iv stosunku 1:9. Ponownie wykonać oznaczenie. Otrzymany wynik pomnożyć przez 10.

5. Duże dawki kwasu askorbinowego mogą powodować zaniżenie wyników.

LITERATURA

Dokładnie wymieszać, inkubować 15 min. w temp. pokojowej. Odczytać absorbancję prób wzorcowych i badanych wobec próby zerowej pizy i.-500 nm w kuwecie o grubości warstwy ■d=1cm.

1.    "W. Werner. H.G. Rey. H. Wlelrręer: Z. enatyt. Claai. ?52, 224. (1

2.    M.P. Gio:n e: J. C r. Ciem C n. Bid-cbem . :S. SAf.njzS

3.    H. G.-nfi: J. C’:n. CV-~, Cr Bkc Lem.. 17. *. T7. {'.97 u).

Przedsiębiorstwo Przemysłowo-Handlowe „POLSKIE ODCZYNNIKI CHEMICZNE ” Spółka Akcyjna

44-101 Gliwice, ul. Sowińskiego 11 Jol. (032 )31 -20-S1, telex: 316363. fax 312660