Inżynieria 2id 455

J^2 Stmlciy do icakt |i l'< l<

C/'}) ^w A-dc/uoui od tdu iv11 długość powinrub wynosić od 14-40 ni. n zawartość G*C powinna być podobna do M»wa**'*'-¹

'>^ł<’ w matiycnwym I>bJA

b)    ich kom. c V mogą być komplementarne do siebie

c)    u h końce V |K»wmny /.iwiernć sekwencje pahndromiczne

(^dnieli dliip.ość mo/c być więkc/n dla dłuższych amplifikowanych fragmentów DNA

13.    Multipleksowy |*( K

a)    w ti akue tej icakcji wydajnie powielana jest tylko jedna nić DNA “

b)    stosuje się w mej kilka p.u starterów o różnej temperaturze topnienia —

(en polega na nm|dilikacji kilku regionów w czasie jednej reakcji PCR

fuj) wykorzystuje się go do diagnostyki chorób genetycznych

14.    Tcrmoshihilnc polimerazy:

a)    polimera/a Tih posiada zdolność odwrotnej transkrypcji w obecności jonów Mg‘

b)    polimera/a /*/i/ ma bardzo wysoką procesy w ność, ale wysoką częstość wstawianych błędów —

(~ęn> polimera/a Deep Vcnl ma bardzo wysoką proccsywność i bardzo wysoką oporność termiczną ulw polimcraza Pfu podobnie jak polimeraza Deep Vcnt posiada aktywność korektorską

15.    Do konwersji końców lepkich na tępe można użyć:

fiNAzy I

agmentu Klonowa ('bonuklcazy

4 DNA polimerazy, np. do konwersji końców 3-wy stających

16. Zaznacz prawdziwe:

)

a) polimera/a laga T7 ma takie same aktywności jak holoenzym polimerazy 1 DNA b) polimcraza faga T7 ma takie same aktywności jak fragment Klcnowa (ęnpolimcia/a laga T7 charakteryzuje się wielokrotnie wyższą proccsywnością i dokładności syntezy w porównaniu / Jragmentem Klcnowa

fimpochodne polimerazy T7 bez aktywności 5’-3’ cgzonukleolityczncj stosuje się w sekewnejonowaniu DNA

17 Fragment KJenowa różni się do DNA polimerazy 1 brakiem aktywności a) 5'-3‘ DNA zależnej polimerazy bt 5’-3* cndonuklcazy fcW5 ‘-3 'cgzonuklcazy <|) 3’-5' egzonuklea/y

2

18. I.iniowy fragment DNA poddano trawieniu trzema różnymi restrvkt»₇>..n; i ■ preparaty poddano analizie clcktroforetycznej i zidentyfikowano następujące liniowe fragn^ty^h^^^b

Ykb

EcoRl HoniHl

/Will

Eco%\ * Iłami W licoRi + //mdl II ham\\I i //mdlii

14.

9.

7;

6 kb

5;

9;

7;

3 kb 2j

1 kb

2;

3:

3 kb

Sporządź mapę restrykcyjną trawionej cząsteczki.

19 Wymień i omów czynniki wpływające na aktywność

2L ²⁰ S^w^Wjbga/ymukica/_y(,

«^n/yⁿ*^OW- ZAMOMIWiUlic)

Otrzymane

enzymów restrykcyjnych

-cozynty ,cs,akcyjne) _u,

uzNAs ane w

vilm

gencyc^ _(fiink

przy ku