kolos3 2

r —

. {a

/ V

C''

•rrfcl :t:»    rr-.t* w .*-rr-.-t -

Instytut Biochemii Uniwersytetu Warszawskiego

1	2	3	4	5	6	7	'a	9	10

SPRAWDZIAN Z EN2YUOLOOII c3a stufktfitfw I! roku 20 alycmU 1906 r.

Suma	Oc
	l j

I

Imię.

//-? ■] /? OfUt    ^^tJpA ' M

M.^A.U.Ł................. Nazwisko..........J.KUaJ^

'1CZa-Ł'.x;Źi__________ Cnipi...........SÓr*2.1..JriL

Prosię pnmlijtaC o podpbanlu ws-rystfcich kortol'. z odpcs/kidricjiil txe2 o ^pfcanlu rvizwy grupy . Przy odpc-rWj-dzWch pro^rę rażr.oczyc nurrwr pytania. Każdo odpovdeclz musi byt uzi».Don!ono. Prcwrę udpowiatfot ZiPfto I tcisfo rvs UKrwd.

I

1.    Dlaczego niektóre odwracalne reakcje chemiczne, np. fosforylacja i defosfory.acja glukozy, są w kor katalizowane przez różne enzymy ?

<~

2.    Fosfoglukomutaza katalizuje reakcję: alukozo-1 -fosforan ⁶⁼⁷ glukozo-6-fosforan .

Do trzech probówek zawierających:

A.    2,5 mM glukozo-6-fosforan

B.    15 mM giukczo-1-fosforan

C.    1 mM glukozo-6-fosforan i 10 mM glukozo-1 -fosforan

dodano 15 pl roztwom fosfoglukomutazy o stężeniu 2 ma/ml. Standardowa zmiana energa swob. katalizowanej reakcji AG⁰ wynosi -1,7 kcal.

W której probówce (A, B, czy C) stosunek stężeń glukozo-1-fosforanu do giukozo-6-fosforanu tę najwyższy po zakończeniu reakcji ? W jaki sposób można 'wyliczyć te wartości?

}

3.    W jaki sposób można wyznaczyć nieznaną szybkość maksymalną enzymu, cSa którego literat, wartość K_m wynosi 4x10'² M. Zaproponuj najprostszy schemat doświadczenia. Odpowiedź iizasaon:

i j

4.    W próbie zawierającej inhibitor współzawodniczy (kompetycyjny) reakcja enzymatyczna przebić • szybkością, równą 76% szybkości obserwowanej w próbie kontrolnej, nie zawierającej rnhib

dczerńe powtórzono rozcieńczając obie próby dwukrotnie buforem i rozpoczynając reakcję docfa_: takiej samej ilości enzymu jak poprzednio. Scharakteryzuj początkowe szybkości reakcji wyznaczę n kontrolnych i dla prób z inhibitorem w obu powtórzeniach eksperymentu ? W jakim stopniu re I -gdzie hamowana w drugim doświadczeniu? Odpowiedź uzasadnij.    i

5.    W jakich warunkach należy wyznaczać I w jakich Jednostkach przedstawiać aktywność egm

Odpowiedź uzasadnij.    !

6 Vj ,vóch niezależnych doświadczeniach, mających na celu wyznaczenie wartości K_u I . e:,/ . m o takim samym stężeniu, a otrzymano znacznie różniące się wyniki. State kinetyczne wył; me.odąUneweavera-Burka. Przyczyną uzyskania różniących się wyników mogło być: a. -poprawne wyznaczenie początkowych szybkości reakcji dla poszczególnych stężeń 3Ubstrató h. : żnica temperatur mieszaniny inkubacyjnej w czasie pomiarów szybkości reakcji.

O •wiedź krótko uzasadnij, posługując się terminami teorii Mlchaefoa-Menfen.

2/3