na studia1 (10)

f\

V

Wektory są to odpowiednio skonstruowane cząsteczki DNA, które sfuzą do przenoszenia obcego DNA do komorek.

Sa to dwuniciowe, koliste cząsteczki DNA, które zawierają:

1.    sekwencje origin replikacji z różnych plazmidów, wirusów lub fagów;

2.    sekwencje markerowe;

3.    sekwencje - miejsca do wkłonowywania;

4.    sekwencje silnych promotorów (nie zawsze);

5.    inne sekwencje różnego pochodzenia (prokariotycznego, .eukariotycznego-, wirusowego, wzmacniające ekspresję, \Jaiwiajace translację^itp.)

Gen chimeryczny to gen zawierający sekwencję promotprową. i terminującą, innego; pochodzenia (nie swoją). c    . >-

dam metylaza rozpoznaje sekwencję 5’ GATC 3’ -pozycja N⁶; adeniny .:

.dcm mietyiaza rozpoznaje sekwencję 5’ GCAGG    CCTGG 3'    . 'V'..

.. .. .    '    - pozycja C¹ cytozyny ;^;

tPTG = iźópropyta-j3-D^^

system R-M = restrykcyjno- modyfikacyjny

ⁿ    Kryteria czystości restryktaz

l 1. trawienie DNA

' 2. brak 3’5’specyficznych egzonukleaz

3.    brak nukleaz specyficznych dla jednoniciowego DNA

4.    brak fosfataz

K

* »>

•r.

1

   homogenność enzymu

*