skan46

1.2. Przykłady badań w mikrometodach kolumnowych 1.2.1. Wykrywanie alloprzeciwciał w teście enzymatycznym

Do wykonania testu stosuje się mikroprobówki serologicznie obojętne. Można stosować jednostopniowy test enzymatyczny z dodatkiem enzymów proteolitycznych np. papania, bromelina lub dwustopniowy test enzymatyczny z wykorzystaniem krwinek papainowanych

•    do kolejnych mikroprobówek wypełnionych żelem dodać:

-    50 pl 0,8% zawiesiny odpowiednich krwinek w LISS

-    25 pi surowicy badanej

-    25 pl bromeliny lub odczynnika papainowego

•    do mikroprobówek wypełnionych ziarnami szklanymi dodać:

-10 pl 3% zawiesiny odpowiednich krwinek w PBS

-    45 pl surowicy badanej

-40 pl odczynnika papainowego

•    inkubacja 15 min. w temperaturze 37°C

•    po inkubacji kasety wirować w wirówce firmowej

•    wynik należy odczytać makroskopowo i zapisać w formie protokołu

1.2.2. Wykrywanie alloprzeciwciał w pośrednim teście antyglobulinowym

Do wykonania testu stosuje się kasety z mikroprobówkami zawierające surowicę antyglobulinową.

•    do kolejnych mikroprobówek wypełnionych żelem dodać:

-    50 pl 0,8% zawiesiny odpowiednich krwinek w LISS

-    25 pl surowicy badanej

•    do mikroprobówek wypełnionych ziarnami szklanymi dodać:

-10 pl 3% zawiesiny odpowiednich krwinek w PBS

-45 pl surowicy badanej

-    40 pl odczynnika LISS

•    inkubacja 15 min. w temperaturze 37°C

•    po inkubacji kasety wirować w wirówce firmowej

•    wynik należy odczytać makroskopowo i zapisać w formie protokołu

SCHEMAT WYKONANIA PRÓBY ZGODNOŚCI I WYKRYWANIA PRZECIWCIAŁ

Krwinki dawcy    Krwinki wzorcowe

0 Rh+ DCCee 0 Rh+ DccEE 0 Rh- dcceeK

I    I-1-i

serologia grup krwi w praktyce