skanuj0005

regulatora temperatury czaszy grzejnej a po ok. 30min. w wyższej temperaturze odpowiadającej pozycji 10 pokrętła regulatora temperatury.

Sprawnie prowadzona mineralizacja trwa do 1h - mineralizację można uznać za zakończoną jeżeli zawartość kolby jest klarowna zielonkawo-niebieska lub bezbarwna bez widocznych ciemnych, niezmineralizowanych części próbki.

Po zakończeniu mineralizacji wyłączamy ogrzewanie czaszy i po ok. 10min. w celu wstępnego ochłodzenia ostrożnie przenosimy wciąż silnie ciepłą kolbę do wolnej i chłodnej czaszy w bloku grzejnym, w którym była prowadzona mineralizacja. Po ok. 15min. wychłodzoną wstępnie kolbę ze zmineralizowaną próbką chłodzimy ociekowo wodą - NALEŻY ZWRÓCIĆ UWAGĘ ABY KOLBA NIE BYŁA ZBYT GORĄCA, BOWIEM W KONTAKCIE Z ZIMNĄ WODĄ KOLBA MOŻE ULEC ZNISZCZENIU A ODŁAMKI SZKŁA I SILNIE ŻRĄCA ZAWARTOŚĆ KOLBY MOGĄ BYĆ POWODEM USZKODZEŃ CIAŁA I ODZIEŻY U OSOBY NIEROZWAŻNIE WYKONUJĄCEJ DOŚWIADCZENIE JAK I OSÓB POSTRONNYCH.

Ochłodzoną do temp poniżej 20°C zawartość kolby ostrożnie (efekt egzotermiczny) rozcieńczyć dodając cylindrem 100cm³ wody destylowanej, ponownie ostudzić i przenieść ILOŚCIOWO (BEZ STRAT) do kolby miarowej o pojemności 250cm³ i dopełnić wodą destylowaną do 250cm³ (mając na uwadze, że kreska na szyjce kolby wskazuje napełnienie 250cm³ tylko w jednej określonej, temperaturze).

50cm³ jednorodnego roztworu z kolby przenieść ILOŚCIOWO do kolby destylacyjnej aparatu Parnasa. Do odbieralnika (kolby stożkowej o pojemności ok.300cm³ ) odmierzyć ILOŚCIOWO 30mi 0.1 mol/dm³ mianowanego roztworu HCI i dodać kilka kropli odczynnika Tashiro. Odbieralnik ustawić u wylotu chłodnicy aparatu tak aby jej wylot był zanurzony w kwasie. Następnie wlać do kolby destylacyjnej 50ml 25-35% roztworu NaOH. W celu zminimalizowania ryzyka „zapieczenia” szklanego szlifu zaworu przez pozostałości NaOH oraz tworzący się Na₂C03 przepłukać lejek wlewu niewielką ilością (5-15cm³) wody destylowanej, obracając jednocześnie kranik co najmniej o jeden pełny obrót. Po zamknięciu wszystkich kraników aparatu Parnasa i upewnieniu się, że woda chłodzącą przepływa przez chłodnicę należy włączyć ogrzewanie wytwornicy pary aparatu Parnasa i rozpocząć destylację amoniaku z parą wodną z alkalicznego roztworu soli amonowych zawartych w kolbie destylacyjnej aparatu. Po oddestylowaniu ok. 100cm³ sprawdzić za pomocą papierka wskaźnikowego u wylotu chłodnicy czy destylat zawiera jeszcze amoniak. Po skończonej destylacji (oddestylowaniu całego amoniaku) zawartość kolby miareczkować 0.1 mol/dm³ roztworem NaOH wobec odczynnika Tashiro do chwili zmiany zabarwienia roztworu na zielony.

KONTROLNA PRÓBA ODNIESIENIA:

UWAGA- PROSZĘ ZAPYTAĆ PROWADZĄCEGO KTÓRĄ OPCJĘ WYBRAĆ!!!! OPCJA A) - DOKŁADNIEJSZA

Równolegle z oznaczeniem białka surowego wykonać próbę kontrolną („ślepą”). W tym celu do kolby Kjeldahla włożyć 0,5- 1,5cm² bibuły bezazotowej (kawałek sączka) ą następnie prowadzić mineralizację, destylację i miareczkowanie przy użyciu ilości, odczynników i procedur jak przy próbie właściwej.

OPCJA B) - SZYBSZA - może być mniej dokładna od ww.

Do kolby stożkowej o pojemności 250-400 cm³ wlać z biurety 30cm³ 0.1 mol/dm³ mianowanego roztworu HCI i dodać kilka kropli odczynnika Tashiro.