CCI00000

Góra(top) transferrin(90.000)

Albumina surowicy(69.000)

Alfa - antytrypsyna(45.000)

Mioglobina( 17.000)

Dól(bottom)cytochrom c (13,400)

2.    jeśli 5 białek z zadl, zostało rozseparowane w izoelektrycznym skupiającym eksperymencie jaki będzie ich podział pomiędzy pozytywnym a negatywnym koncern żelu.

Katoda(-) -► Anoda(+)

(wysokie pH)    (niskie pH)

Cytochrom C(10,6)Transfcrin(5,9)    ———albumina surowicy(4,8)

Mioglobina(7.0)    ^alfa-trypsyna(5.4)

Wskaż najwyższy i najniższy koniec pH.

3.    Które z następujących zdań nie sa prawdziwe?

a.    pi jest wartością pH, w której białko nie ma ładunku(prawdziwe)

b.    w wartości pH równej wartości Pi, białko nie bedzi się poruszało w polu elektrycznym w eksperymencie elektroforezy(nieprawdziwe)

c.    kwaśne białka będą miały pi wieksze od 7()

d.    białka zasadowe będą miały pi wieksze od 7()

4.    SDS-poliakryloamidowy żel w elektroforezie i metoda izoelektryczna separacji białek mają cech wspólne :

a.    Rozdzielają rodzime białka - ogniskowanie

b.    Używają pola elektrycznego - ogniskowanie i elektroforeza

c.    Rozdzielają białka zgodnie z ich masa - elektroforeza

d.    Wymagają gradientu pH - ogniskowanie

O e. Są wykorzystywane na nośnikowych matrycach żelu matrycowego - ogniskowanie i elektroforeza

5.    Przed wysokociśnieniową chromatografią cieczową została wynaleziona separacja i analizy małych białek, elektroforeza na papierze była często używana.

rozdzielanie jest efektywne na podstawie ładunku w białku w różnych wartościach pH. Podaj przewidywany kierunek migracji następnych białek w danych wartościach pH.

Użyj C w migracji w kierunku katody, negatywny biegun.

A migracja w kierunku anody, dodatni biegun O jeśli białko zostaje w miejscu

Którez następujących zdań dotvc^cvph pi et od v degradacji Edmana są prawdziwe? (wszystkie) i aj Fenyloizotiocyjanian jesupKS^eszty aminowej

/ b) Raz PTH aminokwas jest rozdzielną formą oryginalnego peptydu, nowy cykl degradacji sekwencji może zostać rozpoczęty

IcJ Poniżej średnio kwaśnego stanu, zmodyfikowane jlst rozcinane w cykliczna pochodna ^ ostatecznego/końcowego aminokwasu i krótkie białko (minus ten powstały aminokwas)

\dj Jeśli białko ma zalokowaną resztę aminokwasowi(jak N-formylometionina), nie reagują z fenylem izothiocynate

które z poniższych sa użyteczne w identyfikowaniu reszt aminokwasowych:

a.    bromocyjanian (nie)

d.    chlorek dabsylu (tak)

b.    dinitrofluorobenzen (tak)

e.    fenyloinotjocyjanian(tak)

c.    kwas perforowany (nie)

kiedy sekwencja białka „one tries” do generowania zachodzących na siebie białek w użyciu rozłamu specyficznych stron, które z następujących zdań o rozłamie powodowanym przez poszczególne chemikalia albo enzymy sa prawdziwe?:

a.    cyanogen bromie rozcina karboksylowa stronę treoniny(fałsz)

b.    trypsyna rozcina karboksylowa stronę Lizyny i Argininy(prawda)

c.    chymotrypsyna rozcina karboksylowa stronę aromatycznych i duże (o dużej masie) aminokwasy(praw da)

d.    2-nitro-5-tiocyjanobenzen tnie stronę aminową reszty cysteiny(prawda)

e.    Chymotrypsyna tnie karboksylowa stronę asparaginy i glutaminy(fałsz)

a.    wiedza a aminokwasowym skaldzie pomaga „elucidate” podstawy molekularne aktywności biologicznej TAK

9.    I Które z nastepujacyh technik sa używane do lokalizowaniaąinninnrrhmiiyiiih wignnń w białkach?:

—f ^*a. Białko najpierw jest redukowane i karboksymetylowane NIE

^ b. Białko jesy rozcinane przez kwaśną hydrolizęNIE( nie białko tylko peptyd)

Białko jest specyficznie rozcinany poniżej warunków tak ze pozostają nietknięte mostki disiarczkoweTAK (w warunkach nieuszkadzających wiązań dwusiarczkowych)

—— d. Białko jest rozdzielane za pomocą SDS-poliakryloamidowy żel elektroforezą NIE

/e\ Białko jest rozdzielane przez dwuwymiarową elektroforezę z interwencja wykonywaną kwaśnym trktowaniem TAK

10.    które z następujących sa ważna przyczyna do determinowania sekwencji aminokwasów ej białek?:

b.    alternatywny skład aminokwasowy może powodować nienormalne funkcjonowanie i choroby TAK

c.    skład aminokwasowy zapewnia wgląd w kierunek ewolucji i strukturę białekTAK

d.    trójwymiarowa struktura białek może być pezwidywana poprzez ich skład aminokwasowy NIE

e.    sekwencji aminokwasów dostarcza informacji o przeznaczeniu i procesach niektórych białek TAK (sekwencje aminokwasowi stanowiące odcinki sygnałowe)

f.    sekwencja aminokwasów pozwala przewidzieć sekwencje DNA „enconding” w ten sposób ułatwia przygotowanie prób DNA na miejsca specyficznych regionów genów TAK (można skonstruować sondy DNA odpowiadające fragmentowi sekwencji takie sondy z kolei można wykorzystać do

(3) przeciwciała produkowane przez (hybridoma???) komórki

(4)    grupy rozpoznawane przez przeciwciała

(5)    heterogeniczne przeciwciała

(6)    homogeniczne przeciwciała

(7)    przeciwciała produkowane przez wstrzyknięcie zwierzęciu z obcymi substancjami

(8)    (epitopies???)

Przeciwciało (inaczej immunoglobina) jest białkiem syntezowanym przez zwierzęta w odpowiedzi na obecność obcej substancji zwanej antygenem.

Białko, polisacharydy kwasy nukleinow są efektywnymi antygenami

Przeciwciała rozpoznają specyficzną grupę lub zespół aminokwasów, znajdujących się na dużej cząsteczce i taką grupę nazywa się determinanta antygenową lub epitopem .

Wstrzykuje się myszy antygen i po kilku tygodniach pobiera się od niej śledzionę . Mieszaninę komórek ze śledziony poddaje się In vitro fuzji z komórkami szpiczaka. Każda z powstałych komórek hybrydowych, zwana komórką hybrydoma, stale wytwarza homogenie przeciwiała o swoistości określonej przez macierzystą komórkę z>-śledziony.

Komórki produkują wiele różnych przeciwciał, z których każda rozpoznaje inną ceche powirzchnii tego samego antygenu - przeciwciała heterogenne, poliklonalne

Przeciwciała monoklonalne to przeciwciała o dowolnej i pożądanej swoistości

Zad 12

Które z następujących jest zwykle używane jako grupa ochraniająca podczas syntezy białka

(a)    tert-butyloksykarbonyl (grupę alla-aminową pierwszego aminokwasu w syntetyzowanym peptydzie blokuje się grupą tert-butyloksykarbonylową)

(b)    dicykloheksylokarbodiimid DCC ( grupę karboksylową tego samego aminokwasu aktywuje się w reakcji z DCC)

(c)    dicylkoheksylomocznik (odczynik wiążący)

???(d) fluorek wodoru

???(e) izotiocyjanian fenylu