Ul odczytać Abs przy X = 360 i 380 nm.
Uwaga:
Wyniki F(-) mogą obejmować 20% wszystkich przypadków. W tych warunkach wskazane jest wykonanie oznaczenia VMA i/lub katecholamin w świeżo oddanym moczu, uzyskanym po napadzie ciśnienia.
METANEFRYNY (metoksykatecholaminy)
■ metabolity amin katecholowych:
^-jJhetanefryna - metabolit adrenaliny
- ńormetanferyna — metabolit noradrenaliny
* metanefryny stanowią 10% metabolitów katecholamin wydalanych z moczem
■ w moczu występują w formie związanej w postaci glikozydów kwasu glukuronowego lub połączeń z kwasem siarkowym
• | wydalania metanferyn z moczem - guz chromochłonny nadnerczy (pheochromocytoma) Oznaczanie metanefryn metoda chromatografii kolumnowej
Analiza metanefryn jest poprzedzona kwaśną hydrolizą prowadzącą do rozerwania połączeń metanefryn z kwasem glukuronowym i siarkowym.
Metoda polega na adsorpcji katecholamin i metanefryn na kolumnie.
W obecności wodorotlenku amonowego metanefryny są następnie wymywane z kolumny i po utlenieniu do waniliny oznaczane spektrofotometrycznie.
Katecholaminy oznacza się ilościowo za pomocą metod fluorymetrycznych.
Zaadsorbowanie na kolumnie jonowo-wymiennej katecholaminy są wymywane kwaśnym roztworem i utleniane żelazicyjankiem potasowym do adrenochromów. Powstałe fluorofory są stabilizowane alkalicznym roztworem kwasu askorbinowego, a ich Abs jest kolejno odczytywana na fluorymetrze.
Mocz o ustalonym pH + czynnik chelatujący | |||
(wymywanie HC1) -X |
(wymywanie amoniakiem) X |
(wymywanie kwasem bornym) HI ____ | |
DOPAMINA |
METANEFRYNY 1 " |
ADRENALINA, NORADRENALINA | |
X • bufor o pH 3,5 1 ^ |
X bufor o pH 6,5 ■| | ||
utlenienie do związku fluorescencyjnego |
pomiar spektrofotometryczny | ||
odczyt na fluorymetrze |
adrenalina |
adrenalina + noradrenalina |