Fiuorescencję można wywołać w różny sposób dostarczając energii cząsteczkom:
- naświetlenie promieniowaniem,
- polem magnetycznym,
- w reakcji chemicznej lub biochemicznej.
W przypadku fotoluminescencji natężenie fluorescencji jest proporcjonalne do natężenia promieniowania wzbudzającego, intensywność fluorescencji jest proporcjonalna do stężenia luminoforu.
Fiuorescencję mierzy się najczęściej pod kątem 90° względem wiązki padającej.
niska granica wykrywalności, (102 - 104 niższa niż dla spektrofotometrii UV-Vis wysoka selektywność.
Analiza:
związków biologicznie czynnych, środków farmaceutycznych, środków spożywczych, środowiskowej, np. WWA
Fluorymetria jest metodą czułej i selektywnej detekcji stosowanej w chromatografii cieczowej
•i Dr Stanisław Walas
Zakład Chemii Analitycznej UJ
Dr Stanisław Walas
Zakład Chemii Analitycznej UJ
Metody pomiaru zmętnienia ośrodków płynnych oparte o rozpraszanie promieniowania na cząstkach zawiesin. Wiązka promieniowania przechodząc przez zawiesinę może ulegać:
* absorpcji i rozproszeniu,
absorpcji i rozpraszaniu wiązka ulega, gdy cząstki stałe mają zdolność absorpcji danego zakresu widmowego.
• rozpraszaniu
wiązka promieniowania jest tylko rozpraszana, gdy cząstki stałe nie mają zdolności absorpcji.
Dr Stanisław Walas
Zakład Chemii Analitycznej UJ
Metoda turbidymetryczna wykorzystuje pomiar promieniowania przechodzącego przez mętny ośrodek - na sygnał wpływa zarówno rozpraszanie jak i absorpcja promieniowania.
Metoda nefelometryczna wykorzystuje tylko pomiar promieniowania rozproszonego - detektor ustawiony jest najczęściej pod kątem 90° do kierunku wiązki padającej j
Rozproszenie nie jest specyficzne czy nawet selektywna.
7 Dr Stanisław Walas
Zakład Chemii Analitycznej UJ
** ;
v;
Metoda obejmuje analizę absorpcji promieniowania podczerwonego przez oscylujące atomy i grupy atomów w cząsteczce.
Promieniowanie elektromagnetyczne z zakresu podczerwieni absorbowane przez cząsteczki zmienia energie oscylacyjną i rotacyjną cząsteczki (spektrometria IR).
W przypadku cząsteczek symetrycznych w widmie IR występują pasma odpowiadające tylko tym drganiom w cząsteczce, które powodują zmiany momentu dipolowego cząsteczki.
Najczęściej stosowaną jednostką długości fali w podczerwieni jest cm-1.
Dr Stanisław Walas
Zakład Chemii Analitycznej UJ
35
Spektrofotometry do analizy widm w podczerwieni można podzielić na:
• spektrofotometry klasyczne,
♦ spektrofotometry z transformacją Fouriera.
Źródłem promieniowania podczerwonego są żarzące się ciała stałe takie jak:
♦ włókno Nernsfa - pręt ceramiczny z tlenków ceru, cyrkonu, toru i itru,
• globar - pręt silitowy z SiC.
Kuwety pomiarowe zaopatrzone są w okienka z materiałów przepuszczających promieniowanie podczerwone, np. ze związków jonowych typu NaCI.
Dr Stanisław Walas Zakład Chemii Analitycznej UJ 36