317 (18)

Pomiary absorbancji kwasów nukleinowych stanowili łatwą metodę analizy stopnia dcnaturacji. a wielko# elcktu hipcrchromowego zależy od składu nuklcoty-dowego zasad.

W zakresie preparatywnym różnice widm absorpcji kwasów nukleinowych = 260 nm) i białek (A^ = 280 nm) są wykorzystywane do określenia stopnia oczyszczenia nukleoprotein (k ■ A^A^.

12.3.2.2. Spcktropolarymctria

Spektmpolarymetria jest instrumentalną metodą pomiaru wykorzystującą spolaryzowane promieniowanie elektromagnetyczne, najczęściej w zakresie długości fal od 200 do 500 nm. I>o oznaczeń polarymetrycznych stosuje się światło spolaryzowane liniowo.

Niektóre związki chemiczne wykazują zdolno# skręcania płaszczyzny polaryzacji przechodzącego przez nie św iatła spolaryzowanego. Nazywa się je optycznie cennymi, a zdolno# skręcania płaszczyzny polaryzacji - aktywnością optyczną.

Związki optycznie czynne można podzielić na dwie grupy. Pierwszą grupę stanowią te. które wykazują aktywność optyczną tylko w określonym stanic skupienia, na przykład w sunie krystalicznym (chloran sodowy, kwarc). Druga grupa obejmuje substancje, które wykazują czynność optyczną niezależnie od stanu skupienia zarówno w formie czystej, jak i w roztworze; należą do mej prawic wszystkie biopolimery.

Związki chemiczne optycznie czynne charakteryzują się posiadaniem jednej z dwóch cech - są chiralne albo pozbawione elementów symetrii.

ChiralnoJĆ oznacza, że związek chemiczny może występować w formach cnan-cjomctrycznych. Brak symetrii cząsteczki oznacza, że nie posiada ona centrum inwersji. płaszczyzny ani osi symetrii. Odnosi się to przede wszystkim do związków zawierających asymetryczny atom węgla (na przykład posiadającego cztery różne podstawniki).

Wszystkie związki optycznie czynne wykazują. wx>bcc światła spolaryzowanego. wspólną cechę - dwójłomnoić kołową. Polega ona na tym. że fale spolaryzowane kołowo w prawo i w lewo rozchodzą się z różnymi prędkościami. Jeśli jedna wyprzedza drugą, to w tych roztworach występuje skręcenie płaszczyzny polaryzacji o kąt;

P-lalj-ff    (12.16)

gd/ie: |ah - skręcateutt »hńciw* pr/y dłufofci bli X, I - dtujott drop opycrncj. c - uęłcmt rmiąt-ku opyc/mc c/ymcfo

Czasem stosuje się pojęcie skrfcalnoici cząsteczkowej. określonej równaniem:

1*1-

I «)i-M

100

(12.17)

fdar M jert mwą czątfcctko** i wątku of*y</«ue c/ynftego

317