37423

alfa lakto albumina; beta lakto globulina, albumina serum, kazeina Wiązaniepeptydowedość krótkie, póltorakrotne; bliskość wiazania podwójnego C karbonyl=0 umożliwia to powsatnie struł tur rezonansowych =>wiąz peptyd C-N ma częściowy cliarakt wiąz podwójnego=> C-N jest krótsze niż standardowe C-N => grupa peptydowa zbud z atomów CO-NH- stosunkowo sztywna i pląska, możliwa jest rotacja wokół wiązań C alfa-N i C alfa-C, grupy peptydowe są ułożone pod różnym kątem.

Metoda Melanii M. Bradford wykorzystuje fakt przesunięcia maksimum absorpcji roztworu barwnika Coomassie Brillant Blue (CBB) G-250 z 465 nm do 595 nm po związaniu z białkiem. Cząsteczka barwnika CBB oddziałuje poprzez gnipy S03" z dodatnio naładowanymi resztami aminokwasowymi. Z barwnikiem reagują głównie reszty argminy, w mniejszym stopniu reszty histydyny, lizyny, tyrozyny, tryptofanu i fenyloalaniny. Błękit brylantowy Coomassie G-250 w środowisku kwaśnym ma brunatne zabarwienie, które po reakcji z białkiem zmienia się na błękitne. Natężenie barwy jest proporcjonalne do zawartości białka w roztworze. Białka naleSą do podstawowych biopolimerów wchodzących w skład komórki. Zmiany stęŚenia białek kontrolują procesy metaboliczne komórki. Oznaczenie stężenia białka umożliwia również określenie wartości energetycznej spożywczych produktów białkowych. Odczynnik Bradford używany jest do określenia stężenia białka. Procedura oznaczenia stężenia białek wykorzystuje zjawisko tworzenia się kompleksu pomiędzy barwinkiem (Brilliant Blue G) a białkami. Kompleks bialko-barwnik powoduje przesunięcie długości fali odpowiadającej maksimum absorpcji barwnika z 465 do 595 nm. Wartość absorbancji jest proporcjonalna do stężenia białka. Jako wzorzec białka stosuje się albuminę bydlęcą. Liniowa zależność absorbancji od stężenia lewy w zakresie stężenia białka 0,1-1,4 mg/ml.