107194

IESX-MIKRQLlMrQ.CYTQIQKSięZiSl

O jest to modyfikacja testu cytotoksycznego opracowana przez Terasaki i McClellenda

0 przygotowanie do testu;

■    zawiesiny limfocytów pacjenta izolowanych z krwi obwodowej (w przypadku konieczności określenia antygenów zgodności tkankowej klasy II do badać należy uzyskać zawiesinę limfocytów B)

■    swoistych surowic odpornościowych skierowanych przeciwko antygenom HLA (gotowe surowice anty-HL A)

■    dopełniacza króliczego

0 wykonanie: wszystkie zagłębienia na płytkach Terasaki wypełnia się olejeni parafinowym, a następnie do każdego zagłębienia pod parafinę wprowadza się surowicę anty-HLA o znanej swoistości oraz zawiesinę badanych limfocytów; po inkubacji płytek (37°C, 30 minut) do każdego zagłębienia dodaje się dopełniacz i znowu inkubuje (37°C, 60 minut); po tym czasie dodaje się barwnik (np. eozynę) i po kilku minutach formalinę; płytkę pozostawia się w temperaturze pokojowej na godzinę, po czym odczytuje się wynik

0 wynik: ocenia się w mikroskopie świetlnym wygląd komórek, obliczając odsetek komórek martwych (wybarwionych); ostateczny wynik podaje się wg umownej skali:

❖    poniżej 25% komórek martwych w preparacie - wynik ujemny (dany antygen zgodności tkankowej nieobecny)

❖    od 26 do 43% komórek martwych w preparacie - wynik wątpliw y

❖    powyżej 46% komórek martwych w preparacie - wynik dodatni (dany antygen zgodności tkankowej obecny).

1