109392

Chromatografia podziałowa:

-    w normalnym układzie faz - faza stacjonarna bardziej polarna niż faza ruchoma, feza ruchoma -węglowodory, alkohole lub rozpuszczalniki chlorowane.

-    w odwróconym układzie faz - faza stacjonarna mniej polania niż faza ruchoma, najczęściej stosowana faza ruchoma: bufor - metanol, woda - acetonitryl. THF.

Jakie anality będą wymywane jako pierwsze? —* polanie.

Jak na szybkość wymywania wpłynie zwiększenie polamości fazy ruchomej? —* znacznie przyśpieszy szybkość wymywania.

-    z tworzenia par jonowych do związków' dysocjujących. Wybór rozpuszczalnika na podstawie szeregu eluotropowego.

Fazy stacjonarne

-    polarne fazy stacjonarne:

*SH(CHj):NH;> (aminoalkilowe, aminopropylowe)

*SH(CH₃hCN (cyjanoalkilowe)

*SH(CH₃)>OCHOHCH_;OH (diolowe)

-    nicpolarnc fazy stacjonarne

-    R-(CH₂)₃CH₃ (akta decylowa, oktylowe. butylowe, etylowe)

-    (CH^CftH,,

Zastosowanie:

-    farmaceutyki - antybiotyki, uspokajające, pizeciwzapalne, stereoidy.

-    biochemiczne - aminokwasy, białka.

-    żywność.

-    zanieczyszczenia,

-    chemia kryminalistyczna.

-    medycyna kliniczna.

Chromatografia adsorpcyjna

Faza stacjonarna: żel krzemionkowy, tlenek glinu.

Faza ruchoma: rozpuszczalnik organiczny lub mieszanina rozpuszczalników'

Adsorpcja powierzchniowa na grupach silanolowych -Si-OH. wymywanie w kolejności wzrastającej polamości.

Zastosowanie:

Tabela: Adsorbenty' stosowane w cliromatografii kolumnowej oraz pizykłady ich zastosowania.

Tabela: Rozpuszczalniki uszeregowane zgodnie z wzrastającą mocą elucyjną w cliromatografii adsoipcyjnej na żelu krzemionkowym.

Chromatografia żelowa

Rozdział: wypełnienie polimeryczne (pory o różnej średnicy). Cząsteczki które są za małe lub za duże przechodzą pizez pory. a iiuie są zatrzymywane. Wybiera się odpowiedni bufor do kolumny. Na samym końcu wychodzą te. które są zatrzymywane najdłużej

Faza stacjonarna - porowaty żel o określonej wielkości porów hydrofilowy lub hydrofobowy.

Faza ruchoma - ciecz lub gaz. brak oddziaływali miedzy faza stałą a analitem.

Zastosowanie:

-    cukry', białka, szybkie oznaczanie masy cząsteczkowej lub rozkładu mas cząsteczkowych polimerów, produktów naturalnych.

W porach zatrzymywane są jedynie małe cząsteczki analitu. duże cząsteczki są wykluczane. Chromatograf a powinowactw a

Faza stacjonarna: agarow-a porowate kulki szklane z unieruchomionym ligandem powinowactwa.

-    Ugandy, przeciwciała, inhibitory enzymów.

-    elucja po zmianie warunków fezy ruchomej.

-    funkcje fazy ruchomej.

-    wysoka specyficzność.

Chromatografia jonowymienna