74188

Grupa 4

1.    Technika sporządzania preparatów przyżyciowych oraz trwałych barwionych.

-    preparat przyżyciowy; na szkiełko przedmiotowe nanosi się kroplę zawiesiny komórek drobnoustrojów lub drobina masy komórek do kropli wody. Następnie preparat przykrywa się szkiełkiem nakrywkowym opuszczając je ukośnie tak aby nie powstały pod nim pęcherzyki powietrza. Nadmiar wody należy zebrać skrawkiem bibuły.

-    preparat trwały barwiony; rozmaz wykonujemy rozprowadzając pobrany materiał cienką warstwą na powierzchni odtłuszczonego szkiełka przedmiotowego. Preparat suszymy na powietrzu. Utrwalenie preparatu otrzymujemy przez 3 krotne przeprowadzenia szkiełka( w pozycji ukośnej rozmazem do góry) przez płomień palnika. Utrwalenie ma na celu zabicie komórek i przytwierdzenie ich do szkiełka, co chroni je przed zmyciem w trakcie barwienia.

2.    W jakim celu stosuje się barwienie metodą prostą a w jakim złożoną ?

-    metoda prosta (jeden barwnik) pozwala zaobserwować kształty komórek , ich układ a także możemy określić wielkość komórek.

-    metoda złożona (przypadek Gramma) pozwala określić 2 typy komórek bakteryjnych: gram+ z grubą warstwą mureny zatrzymują kompleks fioletu krystalicznego i jodu przez co pod mikroskopem są fioletowe. Gram - z cienką warstwą mureny nie zatrzymują kompleksu barwników podczas wypłukiwania alkoholem. W tej metodzie stosujemy 2 barwniki.

3.    Podstawowe kształty bakterii.

-    kuliste- ziarniaki, dwoinki, paciorkowce, gronkowce

-    cylindiyczne- laseczka, pałeczka

-    spiralne- przecinkowce, śrubowce

4.    Na czym polega zasada barwienia metodą Gramma ?

-    polega na zastosowaniu dwóch lub większej liczby barwników oraz roztworów związków chemicznych, które działają utrwalająco lub odbarwiająco.

1)    utrwalony rozmaz barwi się fioletem krystalicznym 2 min.

2)    zlewa się fiolet i zalewa płynem Lugola na 2 min

3)    przemywa alkoholem etylowym(aż do odbarwienia) po czym spłukuje się wodą

4)    dobarwia rozcieńczonym roztworem fuksyny przez 2 min i ponownie spłukuje wodą.