6827068616

1.    Na ćwiczeniach do izolacji bakterii z rąk/ powietrza/ okularów itp. zastosowaliśmy podłożę: stałe, był to bulion. Dodano do niego nystatynę , w celu eliminacji możliwości wyhodowania grzybów (działanie przeciwgrzybicze). Powstało wówczas podłoże (typ/wymagania pokarmowe) złożone, które oprócz składników odżywczych posiada w swoim składzie czynniki o działaniu selektywnym

2.    Jaką metodę/y sterylizacji zastosowano do sterylizacji podłożą powstałego w efekcie końcowym w pyt. 1? Podaj nazwę metod/y, czynnik sterylizacji i pozostałe parametry tej sterylizacji.

nazwa: sterylizacja cieplna wilgotna

czynnik sterylizacji: przesycona para wodna pod ciśnieniem

parametry: temperatura 121°C (dzięki zmianie ciśnienia, dodaniu 1 atmosfery), czas 15-30', urządzenie autoklaw

3.    Zamierzasz rozlewać pożywkę do płytek Petriego w boksie laminamym. Krótko scharakteryzuj metodę/y sterylizacji i/lub dezynfekcji:

•    Użyję plastikowych płytek, które wcześniej zostały wysterylizowane przy zastosowaniu czynnika - gazu, czyli np. Tlenek etylenu, gazowy formaldehyd, r-r aldehydu glutarowego

•    Boks laminarny przed uruchomieniem muszę najpierw usunąć z boksu wszystkie urządzenia, zdezynfekować boks np. przemywając alkoholem (etanolem) , a potem włączę lampę kwarcową , która emituje fale o długości 230-280 nm przez 15-30 min. Potem włączę boks, a powietrze w nim, w trakcie pracy, będzie sterylizowane przez nawiew laminarny 15 min ???

4.    Zanim przystąpię do identyfikacji wyizolowanych z powietrza/rąk kolonii bakterii muszę wykonać najpierw rozmaz w celu otrzymania jak najcieńszej warstwy bakterii, aby otrzymać obraz mikroskopowy, który pozwoli zidentyfikować bakterie.

5.    Zamierzasz określić kształt komórek bakterii, które zostały wyizolowane z rąk w postaci kolonii. Opisz, co musisz wykonać i czego potrzebujesz, żeby przeprowadzić wspomniane obserwacje.

Co muszę wykonać: Przygotować rozmaz i utrwalić preparat - wyjałowioną ezą pobieram materiał, wprowadzam na szkiełko podstawowe do kropli wody destylowanej i wykonuje rozmaz. Następnie suszę wysoko nad płomieniem palnika, po czym utrwalam, przeciągając szkiełko z rozmazem 3-krotnie przez płomień palnika. Utrwalony rozmaz barwię metodą prostą. Na schłodzone szkiełko z rozmazem wprowadzam np. fuksynę na 3 minuty, a następnie spłukuję wodą, preparat osuszam bibułkami i oglądam pod mikroskopem przez obiektyw 100x powiększający zanurzony w olejku immersyjnym.

6.    Obserwujesz preparat trwały bakterii z rodzaju Sarcina i Pseudomonas wybarwiony, poznaną na ćwiczeniach metodą złożoną. W mikroskopie widzisz ziarniaki zabarwione na kolor fioletowy i pałeczki na kolor różowy. Jaką metodą barwienia zastosowano, który rodzaj z tych bakterii i dlaczego barwi się na różowo, a nie na niebiesko.

Różowe, tzn Gram-ujemne są to bakterie z rodzaju Pseudomonas, wybarwione metodą wg Grama

Dlaczego? Dzieje się tak, ponieważ w przypadku bakterii gram-ujemnych alkohol/keton niszczy błonę zewnętrzną, a cienka warstwa mureiny nie stanowi zabezpieczenia przed wymyciem wodą fioletowego kompleksu wewnątrzkomórkowego, odbarwiona komórka potraktowana barwnikiem zyskuje barwę barwnika safraniny lub fuksyny (różową).

7.    Obserwujesz preparat trwały barwiony metodą wg Wurtza, wykonany z komórek bakterii z rodzaju Bacillus. Opisz, co możesz zobaczyć stosując mikroskop optyczny z obiektywem powiększeniu 100-krotnym: Mogę zobaczyć przetrwalniki (ponieważ bakteria Bacillus owe wytwarza) zabarwione zielenią malachitową na zielono oraz pozostałą część komórki zabarwioną np. safraniną na czerwono.

8.    Żeby stwierdzić zdolność bakterii do ruchu należy wykonać preparat przyżyciowy

9.    Agar jest to środek zespalający podłoża, otrzymywany z krasnorostów morskich, nieprzyswajalny przez bakterie służy do utworzenia podłoża do hodowli drobnoutrojów bakteryjnych

10-Ciśnienie osmotyczne w pożywce powinno być izotoniczne, regulujemy je przez dodanie soli fizjologicznej NaCI

0,9%

11. Bacillus I bacterium są to nazwy bakterii o kształcie cylindrycznym prostym (pałeczka i laseczka)

12.Staphylococcus są to nazwy bakterii Gram-dodatnich, należący do rodzaju gronkowców

13. Lipopolisacharyd wchodzi w skład budowy zewnętrznej błony komórkowej u bakterii Gram-ujemnych

14. Kwasy tejchojowe wchodzą w skład budowy ściany komórkowej (mureiny) u bakterii Gram-dodatnich

15. Nukleoid jest to obszar cytoplazmy komórek prokariotycznych bakterii i sinic, w którym znajduje się kolista nić kwasu deoksyrybonukleinowego (DNA) w postaci genoforu