2212791087

Celem ćwiczenia jest zapoznanie studenta z metodą wyznaczenia stałych dysocjacji kwasowej purpury m-krezolowej metodą graficzną na podstawie pomiarów spektrofotometrycznych.

Purpura m-krezolowa jest wskaźnikiem wielobarwnym zmieniającym barwę z różowoczerwonej na żółtą w zakresie pH 1.2-2.8 (pKi = 1.90) i z żółtej na purpurową w zakresie pH 7.4-9.0 (p«2 = 8.30).

Odczynniki

roztwór alkoholowy purpury m-krezolowej o stężeniu 0.01 % roztwory buforowe - seria w granicach pH 0.5 - 12

Aparatura i sprzęt laboratoryjny

kolbki miarowe pojemności 10 ml - ilość odpowiadająca użytym roztworom buforowym.

pipeta jednomiarowa pojemności 1 ml    1 szt.

pipeta wielomiarowa pojemności 10 ml    1 szt.

Spektrofotometr SPEKOL 11 UVA/IS z kuwetami 1 cm

Wykonanie ćwiczenia

1. Przygotowanie spektrofotometru do pracy.

a)    włączyć spektrofotometrwciskając przycisk f~l

b)    aby przejść w tryb pomiaru absorbancji wcisnąć klawisz (j3. ^a następnie klawisz i odczekać, aż wyświetlacz będzie wskazywać wartość 0.000.

1.    Przygotowanie roztworów

Do kolbek miarowych o pojemności 10 ml odmierzyć dokładnie po 1.0 ml 0.01 % roztworu błękitu tymolowego. Kolbki uzupełniać kolejno do kreski roztworami buforowymi o pH 0.5-12. Roztwory w kolbkach dokładnie wymieszać.

2.    Wyznaczanie analitycznej długości fali

a)    jedną kuwetę przepłukać przygotowanym roztworem zawierającym bufor o najniższym pH, a następnie napełnić ją tym roztworem w % objętości. Drugą kuwetę przepłukać, a następnie napełnić w V* objętości wodą destylowaną (odnośnik).

UWAGA: KUWETY CHWYTAĆ ZA OSZLIFOWANE ŚCIANKI.

b)    ścianki obu kuwet dobrze wytrzeć ligniną w celu usunięcia kropli cieczy i zanieczyszczeń, a następnie umieścić w celkach spektrofotometru.

c)    ustawić na spektrofotometrze długość fali X = 400 nm za pomocą pokrętłą zmiany długości fali.

d)    kuwetę z odnośnikiem przesunąć w pozycję pomiarową, wcisnąć klawisz 0 i odczekać, aż wyświetlacz będzie wskazywać wartość 0.000 (zerowanie spektofotometru).

e)    w pozycję pomiarową przesunąć celkę z badanym roztworem i odczytać wartość absorbancji.