Szybkość reakcji katalizowanej przez enzym jest wprost proporcjonalna do ilości aktywnego enzymu w mieszaninie reakcyjnej. Ta zależność jest jednak modyfikowana przez różne czynniki:
> Białka w trakcie przechowywania materiału biologicznego podlegają proteolitycznej degradacji i denaturacii -> utrata natywnej struktury i spadek aktywności. Wrażliwość na te zmiany zależy od rodzaju białka oraz warunków przechowywania (temperatura, czas).
> Enzymy są białkami zbudowanymi z łańcucha aminokwasowego, który odpowiednio zwinięty tworzy skomplikowaną strukturę przestrzenną stabilizowaną oddziaływaniami grup funkcyjnych w aminokwasach oraz często obecnością różnego rodzaju cząsteczek w rodzaju jonów metali takich jak wapń, magnez, żelazo, miedź, mangan, nikiel, a także rozmaitych związków odgrywających rolę kofaktorów. W związku z tym na wynik pomiaru wpływ mają pH, siła jonowa, skład mieszaniny reakcyjnej oraz temperatura pomiaru.
> Z uwagi na to, iż w warunkach patologicznych obserwujemy przeważnie znaczący wzrost aktywności enzymatycznych, dlatego często wyniki oznaczeń enzymatycznych wyrażone są krotnościami wartości górnej granicy przedziału referencyjnego.
(NOLOGY