Jeśli obie warstwy posiadają w przybliżeniu taką samą intensywność zabarwienia (i jednocześnie faza wodna ma mleczny wygląd), to w badanej próbce występuje surfaktant niejonowy. Dla upewnienia się warto wykonać oznaczenie kontrolne z 2 cm3 wody zamiast analizowanej kompozycji.
Metoda z błękitem metylenowym i kwasem siarkowym
W przypadku stwierdzenia obecności surfaktantu anionaktywnego w analizowanej formulacji należy 5 g preparatu rozpuścić w 25 cm3 wody, dodać 20 cm3 0,5M roztworu H2SO4, ogrzewać po chłodnicą zwrotną do wrzenia przez 1 godzinę i ponownie wykonać próbę na obecność surfaktantu anionoaktywnego metodą z błękitem metylenowym. Wynik negatywny wskazuje, że analizowany środek do mycia zawiera wyłącznie siarczany alkilowe jako surfaktanty anionoaktywne (ulegają całkowitej hydrolizie przy ogrzewaniu z roztworem kwasu mineralnego). Wynik pozytywny nie daje jednoznacznej odpowiedzi - siarczany i sulfoniany alkilowe mogą występować obok siebie.
Metoda z rodanokobaltynem amonu
Odczynniki:
1. Roztwór rodanokobaltynu amonowego [(NH4)2Co(SCN)4]
Wykonanie:
Do 5 cm3 10-krotnie rozcieńczonej wodą małej próbki analizowanego środka do mycia ciała dodaje się 5 cm3 roztworu rodanokobaltynu amonu, dokładnie miesza i pozostawia na 1 godzinę. W obecności niejonowego surfaktantu polioksyetylenowego roztwór zabarwia się na niebiesko. W obecności surfaktantu kationoaktywnego wypada z roztworu niebieski osad a roztwór przyjmuje czerwono-purpurowe zabarwienie. W przypadku niejednoznacznego wyniku próby (np. wskutek intensywnego, niebieskiego zabarwienia analizowanego płynu do mycia) korzystne jest dodanie 5 cm3 benzenu lub chloroformu, energiczne wymieszanie układu dwufazowego i obserwowanie, czy warstwa organiczna zabarwia się na niebiesko. Zabarwienie się warstwy organicznej na niebiesko jednoznacznie potwierdza obecność surfaktantu niejonowego.
Metody z błękitem tymolowym, żółcienia metanilowa i błękitem bromofenolowym Odczynniki:
1. Roztwór błękitu tymolowego
2. Roztwór wodny żółcieni metanilowej
3. Roztwór błękitu bromofenolowego
4. 0.005NHC1
5. 0.1NHC1
6. Bufor octanowy o pH = 4,6 Wykonanie:
Do 2 cm3 0,005N HC1 dodaje się 1-2 krople roztworu błękitu tymolowego, 2 cm3 ok 20-krotnie rozcieńczonej, małej próbki analizowanego środka do mycia (roztwór badany) i dokładnie miesza. Zmiana zabarwienia z czerwono-żółtego na czerwono-fioletowe wskazuje na obecność surfaktantu anionoaktywnego w kompozycji.